一种基于sars冠状病毒s蛋白的新型靶向输送生物仿真系统的研.pptVIP

研究背景 研究背景 研究背景 噬菌体展示技术最初被广泛应用于从复杂的重组文库中筛选和特定靶分子结合的蛋白或多肽。 随着发展，该技术也已经被应用到细胞系、组织和疾病模型水平，筛选和鉴定靶向特定细胞系、组织和疾病模型的结合蛋白和多肽。 目前，恶性肿瘤治疗的关键问题之一就是缺乏特异性攻击肿瘤细胞的有效药物。 噬菌体展示技术已经被用来筛选和表达与不同肿瘤细胞表面的特异性大分子结合的多肽或蛋白，以期将这些蛋白或多肽应用到肿瘤靶向药物的设计中。 BRASIL法（ Biopanning and rapid analysis of selective interactive ligands ）是一种通过差异离心的方法将细胞-噬菌体复合物从亲水环境分离到疏水性有机相中，从而与未结合细胞的噬菌体分离的过程。 与细胞结合的噬菌体和细胞一起被离心沉淀到有机相中，而未结合的噬菌体仍以可溶形式保存于上层水相中。 该法仅需一步离心分离就可完成，比当前细胞筛选方法更加快速、简单；而且筛选得到的多肽更加敏感和特异。 最常用的有机相是9:1 [v:v]的邻苯二甲酸二丁酯和环己烷。 利用建立的筛选方法，以A549腺癌细胞 为靶细胞，筛选噬菌体随机12肽库 生物信息学聚类阳性克隆，确定靶向肽序列 构建pET-14b-S2-GFP-TP和pET-14b-S2-MKK6-TP质粒 评价蛋白定向输入功能 噬菌体展示是一项筛