AFP纳米金侧流免疫层析快速检测试纸的研制方立超程平蒋丽莉.DOCVIP

AFP纳米金侧流免疫层析快速检测试纸的研制 方立超(，程平，蒋丽莉，黄辉，李艳，贺娟，邓均，郑峻松 （中国人民解放军第三军医大学医学检验系暨药学院临床检验学教研室 重庆，400038） [摘要] 目的 建立本教研室纳米金侧流免疫快速检测试纸研发的技术平台。方法 通过柠檬酸三钠还原法制备纳米金颗粒。以（A520－A580）为纵坐标，相应的金标记参数（pH、抗体量）为坐标曲线，曲线拐点为选择参数。标记缓冲体系的选择主要标记过程中确定根据免疫金的释放程度和速度选择合适的硝酸纤维素膜和作为结合垫的玻璃纤维素膜。组装检测临床血清标本，比较与ELISA检测的符合率。结果 AFP抗体I最适标记pH为8.5，最适抗体标记量为78(g/ml纳米金，标记缓冲体系为pH8.5 M Tris-HCl溶液硝酸纤维素膜为whatman Immunopore RP，以玻璃纤维素膜Ahlstrom8964作为结合垫和样品垫膜封闭洗涤后在26℃ 湿度26%条件下干燥1h，结合垫在26℃ 湿度26%条件下干燥2h。组装检测临床血清标本阳性检出率与ELISA法符合率为0%。 结论成功建立了本教研室纳米金侧流免疫快速检测试纸研发的技术平台，适用于病原微生物感染及肿瘤特异性标志物的现场快速检测。 Department of Clinical Laborarory Medicine，College of Pharmacy