作物栽培学与耕作学专业毕业论文--干用辣椒种质资源亲缘关系的RAPD分析.docVIP

作物栽培学与耕作学专业毕业论文--干用辣椒种质资源亲缘关系的RAPD分析 关键词：干用辣椒 种质资源 亲缘关系 RAPD 聚类分析 摘要：利用RAPD技术对来自不同生态环境的40份干用辣椒种质资源进行多态性分析和聚类比较，在DNA水平上研究干用辣椒种质资源的亲缘关系，为干用辣椒杂种优势育种的亲本选配提供理论依据。取得的主要研究结果如下： 1.采用改良的CTAB法从干用辣椒叶片中提取DNA，经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测，OD260/OD280比值在1.72-2.0之间，DNA浓度介于190-890ng·μl；结果表明CTAB法提取的DNA条带完整，无降解，可以用于RAPD分析。 2.试验对反应体系中5个重要因子进行了正交试验，筛选出最优的反应体系，并在此基础上对退火温度与循环次数进行单因素试验，从而确定了一套最佳的干用辣椒RAPD反应体系和扩增程序，即反应体系(25μl)为：PCR染料2.0μl，MgCl22.0mmoI·L-1，dNTPs0.6 mmol·L-1，引物0.5μmol·L-1，DNA模板125ng，Taq酶1.25U，超纯水14.9μl:扩增程序为：94℃预变性4 min，40个PCR循环94℃变性1 min，37℃退火1 min，72℃延伸1 min，72℃复延伸5 min，4℃保存。 3.从200条随机引物中选择了扩增效果最好的11个引物进行聚