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电针对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马基质金属蛋白酶2,9影响 　　[摘要] 目的 探讨电针对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。 方法 采用链脲霉素（STZ）侧脑室注射建立大鼠阿尔茨海默病模型，将大鼠分为4组，电针组针刺双肾俞、双太溪、双足三里、百会、大椎等穴位治疗。西药组给予安理申混悬液每天0.5 g/kg，正常组和模型组用等量0.9%氯化钠溶液治疗6周。用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力，同时免疫组织化学法测定MMP-2、MMP-9表达。 结果 与正常组相比，模型组大鼠学习能力降低（P 0.05）。给予电针刺激后，大鼠学习记忆明显改善，与模型组相比差异具有统计学意义（P 0.05）。模型组海马组织MMP-2、MMP-9表达明显增高（22.73±2.61，23.80±2.52），电针组、西药组海马组织MMP-2、MMP-9表达均低于模型组（P 0.05）。 结论 电针能改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆力功能，可能与抑制细胞凋亡有关。 　　[关键词] 电针；老年痴呆；学习记忆；基质金属蛋白酶 　　[中图分类号] R-33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）05（a）-0015-03 　　阿尔茨海默病（Alzheimers disease）是老年人最常见的一种中枢神经系统原发性退行变性疾病，以记忆、认知、智力障碍及人格、情感改变为主要临床表现。流行病学调查发现5%～15% 的老年人有不同程度的痴呆症状，目前AD已成为次于心脏病、肿瘤和脑卒中之后的第4位死亡原因，给家庭和社会带来沉重负担[1]。本研究以STZ致老年痴呆模型为研究对象，探讨电针对STZ致衰大鼠模型的学习记忆能力及海马MMP-2、MMP-9的影响及其机制，为临床应用提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试剂与仪器 　　链脲霉素STZ-Ⅱ（注射前将STZ溶于0.9%氯化钠溶液）；盐酸多奈哌齐（安理申），中国药业有限公司；基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供；Morris水迷宫由中国医学科学院治疗所生产；脑立体定位仪；DJ-6805型脉冲电针仪；Olympus显微镜。 　　1.2 实验动物与分组 　　清洁级健康4月龄Wistar大鼠45只，雄性，体重200～250 g，由白求恩医大实验动物??心提供（批号：2010002），室内常温下常规饲养，经水迷宫测试，筛选其中40只，随机分为4组：正常组、模型组、电针组、西药组。 　　1.3 造模与给药 　　正常组不予处理，其余30只均10%链脲霉素10 μL侧脑室注射，坐标为脑表面下3.5 mm，前囟1.5 mm，矢状缝左右旁开1.5 mm，诱导衰老大鼠模型[2]。电针组针刺双肾俞、双太溪、双足三里、百会、大椎等穴治疗，用 0.25×0.25 mm华佗牌无菌毫针针刺，连接KWD-808全能脉冲电疗仪，电压为2 V，频率为30 Hz，强度以肢体局部轻微颤动为适。西药组给予盐酸多奈哌齐混悬液每天0.5 g/kg，治疗共4周，正常组和模型组用等量0.9%氯化钠溶液。 　　1.4 Morris水迷宫测试 　　（1）定位航行试验：将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中，记录其在3 min内寻找到并爬上平台的时间即逃避潜伏期。如果大鼠在3 min未找到平台，则由实验者用手牵引其至平台上，让大鼠停留10 s再放回笼中，潜伏期记为最高分180 s。分别在治疗前后进行游泳实验，大鼠每次在3 min内寻找到并爬上平台的时间为大鼠的记忆成绩，每日2次，连续4 d，计算平均成绩。（2）空间探索实验：第5天撤除平台，将大鼠任选1个入水点放入水中，测其2 min内跨越原平台所在位置的次数。上、下午各1次，计算平均成绩。 　　1.5 免疫组织化学法测定MMP-2、MMP-9 　　实验结束后大鼠经心脏灌注固定后取脑，固定，梯度酒精中脱水，脱水后浸蜡包埋切片，并将切片黏于多聚赖氨酸处理的载玻片上，烘干，免疫组织化学法测定MMP-2、MMP-9。 　　1.6 统计学方法 　　所有数据采用SPSS 17.0统计学软件包进行处理，计量资料以x±s表示，计数资料采用χ2检验，组间采用独立样本t检验，P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 治疗前后大鼠Morris水迷宫试验 　　见表1。治疗前造模动物逃避潜伏期和跨越平台次数减少与正常组差异有统计学意义（P 0.05），用电针和盐酸多奈哌齐治疗后训练时间明显缩短而且跨越平台次数增加，与模型组的差异具有统计学意义（P 0.05）。 　　2.2 电针对AD大鼠海马组织MMP-2