一株高效纤维素降解细菌的筛选鉴定及酶活测定-海藻活性物质国家.PDFVIP

　山东 农 业科 学　２０１５，４７（９）：６４～６８ ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ 　ＤＯＩ：１０．１４０８３／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－４９４２．２０１５．０９．０１５ 一株高效纤维素降解细菌的筛选、鉴定及酶活测定 刘露，公春艳，李丽，赵宏涛 （青岛明月蓝海生物科技有限公司，山东 青岛　２６６４００） 　　摘　要：以胶南玉米秸秆堆积物为菌源，分离、筛选高效降解纤维素的菌株，并对其进行鉴定和酶活测定。 结果表明：采用以秸秆为唯一碳源进行富集培养及刚果红脱色圈的方法，从胶南玉米秸秆堆积物中筛选出能 降解纤维素的菌株１０株；通过比较透明圈大小，筛选出一株产酶能力较高的菌株０９０１；采用３，５－二硝基水 杨酸比色法（ＤＮＳ）测定菌株０９０１的纤维素酶活为１２６７．４３Ｕ／ｍＬ；根据序列比对结果，构建关于０９０１的系统 发育树，结合其形态特征和生理生化特性将其鉴定为枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）；通过菌株对玉米秸秆的 降解对其降解效果进行验证，降解３０ｄ后玉米秸秆失重率为３６．２％。表明，分离筛选出的枯草芽孢杆菌菌株 ０９０１的纤维素降解能力较高。 关键词：纤维素；降解能力；筛选；鉴定；纤维素酶活 中图分类号：Ｓ２１６．３　　文献标识号：Ａ　　文章编号：１００１－４９４２（２０１５）０９－００６４－０５ ＳｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａＨｉｇｈ－ＥｆｆｉｃｉｅｎｔＣｅｌｌｕｌｏｓｅ－Ｄｅｇｒａｄｉｎｇ ＢａｃｔｅｒｉｕｍａｎｄＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＩｔｓＥｎｚｙｍｅＡｃｔｉｖｉｔｙ  ＬｉｕＬｕ，ＧｏｎｇＣｈｕｎｙａｎ，ＬｉＬｉ，ＺｈａｏＨｏｎｇｔａｏ （ＱｉｎｇｄａｏＢｒｉｇｈｔＭｏｏｎＢｌｕｅｓｅａＢｉｏ－ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６４００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＴｈｅｃｏｒｎｓｔｒａｗｓｔａｃｋｓａｍｐｌｅｓｉｎＪｉａｏｎａｎｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｏｕｒｃｅｓｔｏｉｓｏｌａｔｅａｎｄｓｃｒｅｅｎ ｈｉｇｈ－ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－ｄｅｇｒａｄｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａ，ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅｙｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｎｄｔｈｅｉｒｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｗｅｒｅｄｅ ｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｅｎｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－ｄｅｇｒａｄｉｎｇｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔｃｕｌｔｕｒｅｗｉｔｈ ｃｏｒｎｓｔｒａｗａｓｔｈｅｏｎｌｙｃａｒｂｏｎｓｏｕｒｃｅａｎｄｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆＣｏｎｇｏｒｅｄｄｅｃｏｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｏｎｅｓｔｒａｉｎ０９０１ｗａｓｓｃｒｅｅｎｅｄ ｏｕｔｗｉｔｈｈｉｇｈｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｕｌａｓｅｂｙｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｓｉｚｅｏｆｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔｃｉｒｃｌｅ．Ｔｈｅｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ０９０１ ｗａｓｔｅｓｔｅｄａｓ１２６７．４３Ｕ／ｍＬｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆ３，５－ｄｉｎｉｔｒｏｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ（ＤＮＳ）ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｓｅｑｕｅｎｃｅａｌｉｇｎｍｅｎｔ，ｔｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ．Ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ ｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，０９０１ｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂ ｔｉｌｉｓ．Ｉｔｓｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｎｃｏｒｎｓｔｒａｗｗａｓｖｅｒｉｆｉｅｄ．Ｔｈｅｗｅｉｇｈｔｌｏｓｓｒａｔｅｏｆｃｏｒｎｓｔｒａｗａｆｔｅｒ３０ｄａｙｓｗａｓ ３６．２％．ＩｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｓｔｒａｉｎ０９０１ｈａｄｈｉｇｈｅｒｃｅｌｌｕｌｏｓｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎａ