铝胁迫对大麦可溶性蛋白含量影响.docVIP

铝胁迫对大麦可溶性蛋白含量影响 　　摘要 选用大麦为材料，研究不同Al3+浓度（50、100、500 μmoL/L）对大麦（Hordeum vulgare L.）叶片和根的可溶性蛋白含量的影响。结果表明：在整个处理期间，高浓度Al3+（500 μmoL/L）可诱导大麦叶片中可溶性蛋白，其含量明显高于对照组和其他处理组（除了Al3+浓度为100 μmoL/L）（P0.05）。Al3+处理20 d时，所有处理组叶片中的可溶性蛋白含量都显著高于对照组（P0.05），并且呈现先上升后下降的趋势。在大麦根中，各个Al3+处理组可溶性蛋白含量随着处理时间的延长、处理浓度的增加呈上升趋势（P0.05），但在Al3+处理20 d时，100 μmoL/L Al3+处理组可溶性蛋白含量明显高于500 μmoL/L Al3+处理组（P0.05）。 　　关键词 铝胁迫；大麦；可溶性蛋白 　　中图分类号 S512.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）16-0014-02 　　铝（Al）是地壳中含量最丰富的金属元素（约7%），主要以氧化物和铝硅酸盐形式存在[1]。在酸性土壤（pH值5）中，结合态的铝能够变成可溶性的Al3+，在进入土壤后对大多数植物产生毒害[2]。近几年来，随着工业的快速发展，使环境不断恶化，导致各地频繁出现酸雨，加上生理酸性化肥的应用，导致土壤逐渐酸化，为结合态的铝变成可溶性的Al3+奠定了基础，使铝毒成为限制作物生长和生产力提高的主要障碍因子[3]。铝可以与蛋白质结合，干扰植物细胞代谢，从而抑制植物生长[4]。大麦是我国重要的饲料、粮食、工业原料作物，其具有用途广泛、生长适应能力强等特点[5]。因此，以大麦为研究材料，探讨铝浓度对大麦根、叶片中可溶性蛋白含量的影响，以为大麦铝毒害的机理研究提供依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试材料为市售的当年大麦种子，品种为秀麦11号。供试溶剂为不同Al3+浓度（50、100、500 μmoL/L）的Hoagland 营养液。离心管（Eppendorf 5801R，Eppendorf Co.，Germany）。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 样品处理。大麦种子用自来水浸泡24 h，每天换2次水，待种子露白后，放入铺有湿纱布的托盘中，覆盖湿纱布，放在23 ℃的培养箱中培养。待大麦幼苗刚长出第2片叶，选取长势均匀一致的大麦幼苗分别置于含有不同Al3+浓度的Hoagland 营养液（50、100、500 μmoL/L）中培养20 d，每隔5 d换1次处理液，用气泵对培养液通气。以不添加Al3+作对照（CK）。 　　1.2.2 Hoagland 营养液的配制。Hoagland 营养液成分及浓度为：0.75 μmoL/L K2SO4、0.01μmoL/L KCl、10 μmoL/L H3BO3、0.65 μmoL/L MgSO4·7H2O、1 μmoL/L ZnSO4、2 μmoL/L Ca（NO3）2·4H2O、100 μmoL/L FeEDTA、1 μmoL/L MnSO4·H2O、0.1 μmoL/L CuSO4·5H2O、0.25 μmoL/L KH2PO4、0.05 μmoL/L （NH4）6MO7O4·4H2O，营养液用无离子水配制，pH值调至4.5。 　　1.2.3 可溶性蛋白含量的测定。各处理分别取新鲜的根和完全展开的叶片，用无离子水洗净后用吸水纸吸干水分，分别称重。将叶片、根剪碎于预冷研钵中，加入50 μmoL/L PBS（pH值7.8）2 mL，冰浴研磨成匀浆，转移至离心管，再用1 mL提取介质冲洗研钵3次，合并冲洗液于离心管中，总计5 mL。提取液于4 ℃下10 000 r/min 离心20 min，上清液即为粗酶液，每5 d测定1次。取0.1 mL粗酶液加入3 mL G-250酸性溶液（100 mg/L）中，反应5 min后，用分光光度计测定体系在595 nm下的OD值，可溶性蛋白浓度计算公式如下： 　　C=A595×5×FW/（0.017 424×V） （1） 　　式中，C：可溶性蛋白的浓度（mg/g）；V：反应体系的容积；A595：加入G-250后可溶性蛋白溶液在595 nm的光吸收值；FW：叶片或根的鲜重。 　　1.3 统计方法 　　采用Sigmaplot 10.0 软件进行数据统计作图，选用标准误、平均值进行统计分析，使用SPSS 13.0进行差异性分析。 　　2 结果与分析 　　由图1A可以看出，在处理期间，500 μmoL/L Al3+处理组可诱导大麦叶片可溶性蛋白，其含量明显高于CK和50 μmoL/L处理组（P0.05）。各个Al3+处理组都呈现先升高后下降的趋势，且各个Al3+处