副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用（毕业学术论文设计）.docVIP

目 录 摘 要 1 Abstract 2 前 言 3 1 材料与方法 4 1.1 菌种、血清及其他试剂 4 1.2 抗原的制备 4 1.3 间接ELISA的操作步骤 5 1.4 间接ELISA反应条件的确定 5 1.5 间接ELISA的特异性 6 1.6 间接ELISA的重复性 6 1.7 间接ELISA的临床应用 6 2.1 间接ELISA反应条件的筛选 6 2.2 间接ELISA的特异性 7 2.3 间接ELISA的重复性 7 2.4 间接ELISA的临床应用 7 3 讨论 7 参考文献 8 致 谢 9 附 录 10 副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的 建立与应用 摘 要 采用超声裂解的副猪嗜血杆菌菌体上清作为包被抗原，建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化，确定了最佳反应条件：抗原包被浓度80 ug/mL，37℃ 作用2 h后4℃过夜包被，待检血清的稀释度为1：3201 h，酶标二抗稀释度为l：15 0001 h，底物显色时间为15 min。待检血清S/N值≥2.5时判为阳性，S/N值2.5时判为阴性。特异性、重复性和敏感性试验以及对200份送检血清的检测结果表明，建立的间接ELISA方法的特异性和重复性良好，敏感性比间接血凝试验高，可用于副猪嗜血杆菌的检疫和流行病学调查。 关键词：副猪嗜血杆菌；抗体；间接酶联免疫吸附试