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- 2018-09-25 发布于江苏
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基因表达检测---RT-PCR3
操作步骤(一) RNA Preparation Prepare the plant total RNA by TRIzol Reagent. Dilute the Total RNA to the final concentration of 1 ?g / ?l by DU640. . Combine the following in a 0.5 ml sterile eppendorf tube: Total RNA 3?l (2-5?g) RNase-free DNase ? 1?l (1u / ?l) 10× DNase ? buffer 1 ?l add DEPC-treated ddH2O 5 ?l Incubate at 37℃ for 15 min, then 70℃ for 10 min. 操作步骤(二)Reverse Transcriptase Reaction Add 1 ?l 500 ?g / ml oligo (dT) 15 primer, mix the contents of the tube by gently vortexing and collect the reaction by brief centrifugation.
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