种子特异表达异源DGAT1基因提高大豆种子含油量和营养品.PDFVIP

1478 生 物 工 程 学 报 张飞 等/种子特异表达异源DGAT1 基因提高大豆种子含油量和营养品质 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn Sep. 25, 2018, 34(9): 1478−1490 DOI: 10.13345/j.cjb.180236 ©2018 Chin J Biotech, All rights reserved ·农业生物技术· DGAT1 1 2 2 2 1 2 2 张飞 ，高秀清 ，张靖洁 ，刘宝玲 ，张红梅 ，薛金爱 ，李润植 1 山西农业大学 生命科学学院，山西 太谷 030801 2 山西农业大学 分子农业与生物能源研究所，山西 太谷 030801 张飞, 高秀清, 张靖洁, 等. 种子特异表达异源DGAT1 基因提高大豆种子含油量和营养品质. 生物工程学报, 2018, 34(9): 1478–1490. Zhang F, Gao XQ, Zhang JJ, et al. Seed-specific expression of heterologous gene DGAT1 increase soybean seed oil content and nutritional quality. Chin J Biotech, 2018, 34(9): 1478–1490. 摘 要 : 为提高大豆 Glycine max 种子含油量和营养品质，文中以二酰甘油酰基转移酶 1 (Diacylglycerol acyltransferase 1 ，DGAT1) 基因为遗传修饰靶标。将来自高油植物斑鸠菊 Vernonia galamensis L.编码DGAT1 酶 蛋白的 cDNA 克隆 VgDGAT1A 在大豆种子特异超表达。连续选择获得高代 (T7) VgDGAT1A 转基因大豆株系。 转基因株系表型鉴定显示，在大豆种子发育中期 (30–45 DAF) ，VgDGAT1A 高表达，相应地DGAT 酶活性是非转 基因野生型和空载体转化对照的7.8 倍。转基因成熟种子含油量比对照提高了5.1% ，淀粉含量比对照减少2%–3% ， 蛋白质含量与对照无显著差异。此外，转基因大豆种子百粒重 (14.5 g) 和种子萌发率 (95.6%) 与对照亦无明显 差异。种子油脂脂肪酸成分分析显示，转基因大豆种子油中抗氧化的油酸 (C18:1Δ9) 含量比对照提高 8.2% ，相 应地易氧化的亚油酸 (C18:2Δ9,12) 和亚麻酸 (C18:3Δ9,12,15) 分别减少 6%和 2% 。这些数据表明，种子特异超 表达外源 VgDGAT1A 基因，打破了大豆种子含油量和蛋白质含量的负连锁，显著提高种子含油量且未导致蛋白 含量降低。转基因大豆种子重量和萌发率亦未显负效应，而且种子油脂抗氧化性和营养品质得以改善。研究表明 应用这一高酶活性VgDGAT1A 的基因工程是提高种子含油量和改善油脂品质的一条有效途径。 : 大豆，斑鸠菊，种子营养品质，二酰甘油酰基转移酶 1 (DGAT1)，种子特异表达，脂肪酸和油脂含量 Received: June 8, 2018; Accepted: July 20, 2018 Sup