嗜盐脂肪酶产生菌的筛选及其粗酶性质-微生物学报-中国科学院.PDF

微生物学通报 JAN 20, 2009, 36(1): 14~19 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 嗜盐脂肪酶产生菌的筛选及其粗酶性质 1,2 1 1 1 1,2* 张 萌 张晓梅 窦文芳 许泓瑜 许正宏 (1. 江南大学医药学院制药工程研究室 214122) (2. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 214122) 摘 要: 从内蒙古锡林浩特地区盐湖菌种样品分离获得一株嗜盐脂肪酶高产菌, 结合生理生化试 验和 16S rDNA 序列分析结果, 鉴定并命名为Haloterrigena thermotolerans Z4 。该菌最适生长NaCl 浓度为 3.5 mol/L, 最高生长温度为 60°C, 属于嗜盐耐热古生菌。粗酶性质研究表明, 金属离子 (Ba2+ 、Fe2+ 、Cu2+)对酶有激活作用, 酶活不同程度的提高了20%~30%; 该酶受EDTA 的抑制, 酶 活下降了20%, 受PMSF 的完全抑制。该酶对NaCl 有较高的依赖专一性, 至少需要0.5 mol/L NaCl 维持活性并且高浓度NaCl 可以提高其耐热水平。醇类物质对于提高酶的热稳定性有一定作用, 丙三 醇效果最好。该酶对短链底物对硝基苯酚丁酸酯(p -NPB)的最适水解条件为：pH 8.0 、70°C、3.5 mol/L NaCl; 而对长链底物对硝基苯酚十六酸酯(p -NPP)的最适水解条件为：pH 8.0 、80°C、2.5 mol/L NaCl。 关键词: 嗜盐脂肪酶, 嗜盐古生菌, 鉴定, 酶学性质 Screening of a Halobacteria Strain Producing Halophilic Lipase and Characterization of Crude Enzyme ZHANG Meng1,2 ZHANG Xiao-Mei1 DOU Wen-Fang1 XU Hong-Yu1 XU Zheng-Hong1,2* (1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Medicine and Pharmaceutics, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China) (2. The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China) Abstract: A halobacteria strain Z4 producing extracellular halophilic lipase screened from Hypersaline lak