阻断Rho-ROCK信号传导通路治疗大鼠脊髓损伤的实验研究课件.ppt

实验方法 HE染色 术后4周，剩余实验动物用4℃生理盐水和4 ％多聚甲醛进行心脏灌注固定，取包括距脊髓 横断处上下各10mm的脊髓组织，置于20％蔗糖 溶液中4℃保存过夜。常规石蜡包埋横断位及矢 状位连续切片，切片厚度10μm进行HE染色。 实验方法 NF免疫荧光染色 NF利用罗丹明标记二抗免疫荧光染色。石 蜡切片脱腊、水化，加入3%的过氧化氢甲醇溶 液，室温孵育10min，以消除内源性过氧化物酶 的影响。0.01MPBS清洗5min×3，加封闭血清封 闭，室温20 min；封闭液弃去，加50倍稀释的 相应一抗4℃孵育过夜；PBS清洗5min×3，加相 应二抗室温孵育30min；PBS清洗5min×3，放置 到荧光显微镜下进行观察。 实验方法 统计学分析 所得数据以均数±标准差( ±s)表示，运 用SPSS 10.0统计学软件进行统计学处理，多组 比较采用方差分析，组间比较采用q检验，P＜ 0.05为有统计学意义。 实验结果 组别 术前 3天 1周 2周 3周 4周 A组 B组 C组 21±0 21±0 21±0 21±0 0±0 0±0 21±0 3.7±0.8 5.5±1.2 21±0 3.5±1.1 7.8±0.9 21±0 4.0±1.3 9.8±1.1 21±0 3.9±0.9 11.3±1.3 各