单克隆抗体与基因工程抗体制备幻灯片.pptVIP

单克隆抗体与基因工程抗体制备 多克隆抗体(Polyclonal antibody) 概念 给动物接种抗原所获得的免疫血清或抗血清，是多种抗体的混合物,它是由多种抗原决定簇刺激多株B细胞增殖分化所产生的，称为多克隆抗体。 存在的问题 为不均一物质特异性和亲和力差, 批间重复性差， 用于免疫学检测容易出现交叉反应 单克隆抗体(Monoclonal antibody,McAb) 概念: 通过B细胞杂交瘤技术, 获得特异性针对某一种抗原决定簇的细胞克隆，产生均一性的抗体. 特点: 针对单一表位 结构相同 功能均一 杂交瘤技术的理论基础 淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说，即一种克隆只产生一种抗体 细胞融合技术产生的杂交瘤细胞可以保持双方亲代细胞的特性 利用代谢缺陷补救机理筛选杂交瘤细胞， 杂交瘤技术流程 两种亲本细胞的选择与制备 细胞融合 杂交瘤细胞的筛选与克隆化 两种亲本细胞的选择与制备 小鼠骨髓瘤细胞 免疫脾细胞 骨髓瘤细胞系选择要点： 稳定易培养、自身不分泌Ig、融合率高、HGPRT缺陷株 常用骨髓瘤细胞系有：NS1、SP2／0、X63 等。 保存：防止突变、定期筛选（8-氮鸟嘌呤） 防止支原体污染（