动植物减数分裂过程中染色体行为的观察 山东大学.docVIP

山东大学实验报告 2014年 2 月 科目 遗传学实验 题目 动植物减数分裂过程中染色体行为的观察 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 4 页 遗传学实验报告 动植物减数分裂过程中染色体行为的观察 摘要 减数分裂是指HYPERLINK /view/37923.htm有性生殖的个体在形成HYPERLINK /view/72822.htm生殖细胞过程中发生的一种特殊分裂方式，不同于HYPERLINK /view/8888.htm有丝分裂和HYPERLINK /view/7536.htm无丝分裂，减数分裂仅发生在HYPERLINK /view/555124.htm生命周期某一阶段，它是进行有性生殖的生物性母细胞成熟、形成HYPERLINK /view/826358.htm配子的过程中出现的一种特殊分裂方式。本实验通过获取蝗虫精巢中的精管，经固定、染色、压片后镜下观察不同分裂时期的发育细胞，了解减数分裂时期染色体的动态变化过程，并熟练制片操作。 引言 减数分裂是生殖细胞的分裂方式,对种族绵延有着十分重要的意义。在减数分裂的过程中，细胞连续进行两次的核分裂，而染色体只复制一次，减数分裂结束形成了四个子细胞，每个子细胞中的染色体数目减半。然后经过受精作用，雌雄配子又重新结合，形成了二倍体的合子。减数分裂确保了染色体数目的恒定，从而使物种在遗传上具有了相对稳定性。 蝗虫染色体数目较少(雄性2n=23，XO；雌性2n=24，XX)，且染色体较大，双线期和终变期交叉十分明显(用植物材料则不易看到这个结构)。自然界中蝗虫分布较广，可以用于分析染色体交叉的结构、分布和频率等优势[1], 因此被广泛用于减数分裂过程的观察。 在蝗虫的曲细精管内，从上到下依次排列着不同发育时期的生殖细胞，在这次实验中，通过对蝗虫精巢中的曲细精管进行染色（染液是改良苯酚品红）、制片和镜检，我们观察到了蝗虫减数分裂时期的动态过程和各时期分裂相的特点。 材料和方法 2.1 实验材料 固定的蝗虫精巢，解剖针，载玻片，盖玻片，显微镜，眼科镊； 染液：改良苯酚品红。 2.2 实验方法 2.2.1 取材 根据个体大小和蝗虫腹部末端的下生殖板，选取若干只雄蝗虫，用剪刀剪去双翅，在翅基部的后方（相当于腹部背侧前段），用解剖剪将其体壁剪开，剪刀上方两侧各有一块黄色的团块，即是一对精巢。将精巢放入0.7%的生理盐水中，剔去脂肪，可看到精巢中有许多排列在一起的曲细精管。 2.2.2 固定 固定的目的是采用渗透力强的固定液将组织、细胞迅速杀死，使蛋白质沉淀，并尽量保持原有状态，有利于后续的解离、染色等。 固定液比较常用、有效的是Carnoy固定液：CarnoyⅠ：冰醋酸:乙醇=1:3（应用最为广泛）；CarnoyⅡ：冰醋酸:氯仿:乙醇=1:3:6(含油脂类较多的材料以及需要更加硬化的组织的固定）。 将除去脂肪的精巢投入固定液（甲醇:冰醋酸=3:1），固定时间一般不超过24h，待黄色组织块变白即可（若尚未变白还可继续固定适当时间）之后将固定好的材料转入70%的酒精溶液，置于4℃冰箱中保存备用。 2.2.3 染液制备 2.2.4 制片及镜检 挑取3—4条较粗的曲细精管置于载玻片上，用解剖针轻轻将小管撕破，挤出其中的细胞。滴加1-2滴改良苯酚品红染液，染色约6—10min。将染色后的材料盖上盖玻片，左手压紧盖玻片一角固定，用大拇指压盖玻片中心，用吸水纸将多余的染液吸干。再用解剖针轻轻敲盖玻片表面，使标本分散开来。将玻片置于显微镜下观察。 结果 3.1 实验结果图 图一 蝗虫减数分裂时期各个时期分裂相（部分） A 刚成为次级精母细胞 B 细线期 C 偶线期 D 粗线期 E 双线期 F 终变期 G 终变期向中期转变 H 中期I（极面观） I 中期II J 后期II K 枣核形精细胞 L 梭形精细胞 3.2 实验结果分析 根据观察的结果看，大部分时期的细胞都能观察到，分裂期中处于前期I的细胞最多，其他时期的相对较少，而且由于染色较浅，有些难以辨别。 前期I： A 次级精母细胞：细胞整个形状十分明显，染色质尚未明显高度螺旋化，细胞正变成次级精母细胞，处于即将进入细线期。 B 细线期：染色质凝缩成可见的细线，螺旋卷曲分散在细胞核内，沿着整条染色线分布着许多染色粒，形似念珠，细线团中有一深染色块。 C 偶线期：同源染色体彼此靠近，发生联会。形态上，染色体明显比细线期的粗，但染色体组中每一个成员并不