离子交换层析法课件.pptxVIP

离子交换层析法;最先被洗出的是酸性氨基酸，如apartic acid和glutamic acid（在约pH3~4时），随后是中性氨基酸，如glycine和alanine。碱性氨基酸如arginine和lysine在pH值很高的缓冲液中仍带有正电荷，因此这些在约pH值高达10~11时才出现。;二 、反应机理;三、树脂的选择;1.????? 阳离子交换树脂分为强酸型、中强酸型和弱酸型三类，强酸型树脂含有－R－SO3H，中强酸型树脂含有－PO3H2、－PO2H2或－O－PO2H2，弱酸型树脂含有－COOH或－OH。 阳离子交换树脂进行的反应如下：;;四、交换剂的选择;五、缓冲液的选择;六、离子交换树脂的前处理;七、加样与洗脱; 洗脱时应满足以下要求：①洗脱液体积应足够大，一般要几十倍于床体积，从而使分离的各峰不至于太拥挤。②梯度的上限要足够高，使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快，要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态???目的物的过早解吸，会引起区带扩散；而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。;九、离子交换剂的再生;十、离子交换层析应用