荧光定位-第三军医大学学报.DOC

NUAK1—NFkB通路新转录调控或共调控因子？ 杨兰兰， 刘先俊*（重庆医科大学：分子医学与肿瘤研究中心，重庆 400016） 摘要：目的 确定蛋白激酶NUAK1的定位，检测其是否参与NFkB信号通路。 方法 构建质粒NUAK1-pEGFP顺转于293细胞，然后用DAPY染核，荧光显微镜下观察NUAK1的定位。构建质粒NUAK1-pcDNA3.1和NUAK1( D178N )-pcDNA 3.1，以空载pcDNA3.1做对照，分别过表达于带稳转有NFkB荧光酶素报告基因质粒的293细胞株中，检测在有或没有TNFα刺激下的NFkB荧光酶素报告基因的活性，为进一步确认，对NUAK1-pcDNA3.1 设了个浓度梯度进行检测。结果 NUAK1定位于细胞核中，在293细胞中NUAK1能够抑制NFkB的活性，且和其表达量成正相关。结论 NUAK1有可能是NFkB的转录调控或共调控因子。 关键词： NUAK1；NFKB；239细胞；核定位；转录调控 NUAK1---a new transcriptional regulated or co-regulated factor of NFkB pathway? YANG Lanlan， LIU Xianjun (Molecular Medicine and Cancer Research Center, Chongqing Medical U