人源血管紧张素转化酯-N结构域基因片段在毕赤-浙江理工大学杂志社.PDF

， ， ， 浙江理工大学学报 第 卷 第 期 年 月 28 4 2011 7 JournalofZheian Sci-TechUniversit j g y ， ， Vol.28 No.4Jul.2011 文章编号 ： ( ) 1673-3851 2011 04-0611-05 人源血管紧张素转化 酯-N结构域基 因 片段在 毕赤酵母 中的表达 徐 辉 徐 珏 陈成集 丁 明 许传莲 ( ， ) 浙江理工大学生命科 学学院 杭 帅 310018 ： ， 摘 要 利序 RT-PCR方法从食 管癌 细胞 TE-1中反 转 吐 cDNAPCR扩增得 到血 管 紧张素转化 酶 N结构域 ( ) ， ， ， ， ACE-N基 因片段 构建 pPIC9K-ACE-N表达载体 转化毕赤酵母 GS115阳性克隆再次电转 并从转化 菌株 中筛选 。 2＋ ， / ， 吐多拷 贝转化子进行表达 经 Ni亲和层析柱对表达的蛋 白进行 纯化 获得 的 目的蛋 白表达量为 0.11 L其纯度 g 大于 99%。为今后选择性抑制血管紧张素转化酶两个 情源结构域的体外研 究奠定基础 。 ： ； ； 关键词 血管紧张素转化酶-N结构域 RT-PCR 毕赤酵母 中图分类号 ：Q78 文献标识码 ：A 0 引 言 ( ， )， ， 血管紧张素转化酶 aniotensin-convertin enzmeACE 按系统命名法命名为肽酰二肽水解酶 是一 g g y [ ] 1-3 ， 种哺乳动物组织 中普遍存在 的含锌离子 的膜结合外肽酶 能够通过 肾素 血管紧张素系统和激肽释放酶 - - ， ( ) 激肽系统 催化血管紧张素 水解生成具有收缩血管 的血管紧张素 An 或水解具有血管扩张功能 的 Ⅰ Ⅱ gⅡ [] 4 缓激肽生成苯丙 精二肽 。