内含子源性miRNA通过转录因子AP1调节内皮型-中国动脉硬化杂志.PDFVIP

CN43鄄1262/ R摇 中国动脉硬化杂志2014年第22卷第7期 649 [文章编号]摇 1007鄄3949(2014)22鄄07鄄0649鄄06 ·实验研究 · 内含子源性 miRNA通过转录因子AP1调节内皮型 一氧化氮合酶表达及血管内皮细胞增殖作用 李玉媚,王辉,张文宇,陈伟,胡楠,欧和生 (广西医科大学,广西南宁市530021) [关键词]摇 miRNA;摇 内皮型一氧化氮合酶;摇 内皮细胞;摇 AP1 [摘摇 要]摇 目的摇 前期工作发现,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)第4 内含子的27碱基重复子产生相应27鄄nt miR鄄 NA,并对eNOS的转录和表达有负反馈调节作用。 进一步探讨该内含子源性27鄄nt miRNA对内皮型一氧化氮合酶 基因调节的分子机制及血管内皮细胞增殖相关转录因子AP1的作用机制。 方法摇 应用MTT 法检测人脐静脉内皮 细胞(HUVEC)的增殖抑制率;细胞划痕实验检测HUVEC迁移能力;免疫组织化学方法检测内皮细胞中eNOS和 AP1蛋白表达水平;进一步用Western Blot检测27鄄nt miRNA表达相关情况及细胞核转录因子eNOS表达情况。 结 果摇 27鄄nt miRNA对HUVEC增殖具有强烈抑制作用 (P 0郾05);27鄄nt miRNA 对HUVEC 迁移具有显著抑制作用 (P0郾05);27鄄nt miRNA显著降低eNOS和AP1蛋白表达(P0郾05);27鄄nt miRNA通过负调控AP1降低eNOS蛋 白表达(P0郾05)。 结论摇 27鄄nt miRNA显著抑制eNOS和AP1蛋白表达,AP1在27鄄nt miRNA对eNOS表达调节 中起重要作用。 [中图分类号]摇 R97 [文献标识码]摇 A Intronic miRNA Regulates Human Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene and Pro鄄 liferation of Endothelial Cells by the Transcription Factor AP1 LI Yu鄄Mei,WANG Hui,ZHANGWen鄄Yu,CHEN Wei,HU Nan,and OU He鄄Sheng (GuangxiMedical University,Nanning,Guangxi530021,China) [KEY WORDS]摇 27鄄nt miRNA;摇 Endothelial Nitric Oxide Synthase;摇 Endothelial Cells;摇 AP1 [ABSTRACT]摇 摇 Aim摇 We previously reported that endothelial nitric oxide synthase (eNOS) intron4 of27 bp repeat promoter to produce the corresponding27鄄nt miRNA,which regulated expression of eNOS.摇 This study was to investigate an intronic miRNA regulatedexpressionofthehumaneNOSgeneandproliferationofendothelialcellsbymechanismrelated to the transcription factor AP1.摇 摇 Methods摇 The endothelial cells proliferation inhibition rate was detected by MTT as鄄 say.摇 Migrationabilityof endothelialcellswasmeasuredby scratchwoundmodel