一种新型自体NK细胞扩增培养方法的建立和初步临床应用-罗渊.pdfVIP

空军医学杂志 2011年9月 第27卷 第3期 Medical Journal of Air Force ，Vol.27 ，No.3 ，September ，2011 131 · · • 论 著 • 一种新型自体NK细胞扩增培养方法的 建立和初步临床应用 喆 罗　渊，陆承荣，段连宁，王　 ，向培德，鲍荣凤，何晓锋，朱广卿，李为民 应用一种新型的自体NK细胞扩增培养方法，并进行初步的临床试验。 采集 [摘要] 目的 方法 患者静脉血30ml ，用Ficoll法分离外周血单核细胞，用NKGM 培养体系培养两周，收集细胞后回输 患者。实验全程在GMP实验室进行，并做好质量控制。结果 通过14 d的细胞培养，淋巴细胞总数扩 增了约200 ～300倍，其中NK细胞和CD8+ + T细胞均扩增了约500倍，最终NK细胞和CD8 T细胞的比 例约为36% ～53% 、38% ～51% 。对1例处于化疗后部分缓解的肺癌且伴多发转移的患者进行两个疗 程的细胞治疗，患者血清肿瘤标志物糖类抗原 （CA ）19-9呈进行性降低。而且在NK 细胞输注后的 2 ～6周，仍可检测出患者外周血淋巴细胞中NK细胞的比例高达约31% 。 NKGM 培养体系可通 结论 过两周的培养使外周血单核细胞扩增约250倍，而且NK细胞的纯度可高达53% 。同时，该细胞疗法 具有很好的安全性和便捷性，应用于肿瘤患者可通过维持外周血NK 细胞的高比例而发挥积极的 临床疗效。 [关键词] 杀伤细胞，天然；基因扩增；免疫疗法，过继 [中图分类号] R73-352 [文献标识码] A [文章编号] 2095-3402 （2011）03-131-04 A new method of autologous NK cell culture and expansion for clinical application ＊ LUO Yuan ，LU Cheng-rong ，DUAN Lian-ning ，WANG Zhe ，XIANG Pei-de ，BAO Rong-feng ， ＊ HE Xiao-feng ，ZHU Guang-qing ，LI Wei-min ．Clinical Aviation Medical Lab，Air Force General Hospital ，Beijing 100142 ，China Corresponding anthor ：Duan Lian-ning ，E-mail:duanln@ [Abstract] Objective Adopt a new method of autologous NK cell culture and expansion ， and use it for preliminary clinical trials． Isolate peripheral blood mononuclear cells with Methods Ficoll reagent after pumping 30 milliliter blood from the patient ．Then ，use the NKGM reagent to culture and expand the lymphocytes ．