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实验 影响酶促反应速度的因素 实验目的 通过本实验了解温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。 实验原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。淀粉溶液与碘反应呈蓝色；糊精根据分子大小，与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色；麦芽糖不与碘呈色。唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。 温度：温度降低，酶促反应减弱或停止；温度升高，反应速度加快。当上升至某一温度时，酶促反应速度达最大值，此温度称为酶的最适温度。由于酶的化学本质是蛋白质，温度过高会导致蛋白质构象的改变，因此如果温度继续升高，反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。 酸碱度：唾液淀粉酶最适pH为pH6.9，高于或低于酶的最适pH值，都将引起酶活性的降低，过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。 抑制剂与激活剂：酶的活性常受某些物质的影响，能增加酶的活性称为酶的激活剂：降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。如Cl-为唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。 根据上述性质，可以用碘检查淀粉是否水解及其水解程度，间接判断唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。 三、试剂及器材 1.试剂： 1％淀粉溶液，1％氯化钠溶液，1％硫酸铜溶液，1％硫酸钠溶液，碘液，磷酸氢二钠（0.2mmol/L）, 柠檬酸溶液(0.1mmol/L)。 2.器材： 试管，试管夹，恒温水浴锅(37℃),吸管，滴管，试管架。 四、实验操作： 1.收集唾液：实验者先将痰咳尽, 用自来水漱口, 清除口腔内食物残渣, 再含蒸馏水约15 mL, 作咀嚼咕漱运动, 3min后吐入小烧杯中备用。 2.观察温度对酶促反应速度的影响 取试管3支，编号1,2,3，按下表操作： 试剂(ml) 1 2 3 唾液 1 1 1 1%淀粉 2 2 2 水浴5min 100℃（冷却） 37℃ 0℃ 碘液 1滴（冷却） 1滴 1滴 现象 3. 观察pH对酶促反应速度的影响 （1）配制一系列pH不等的缓冲液。 试剂(ml) 1 2 3 0.2mmol/L磷酸氢二钠 5.15 7.72 9.72 0.1mmol/L柠檬酸 4.85 2.28 0.28 pH 5.00 6.80 8.00 （2）取试管3支，编号1,2,3，按下表操作： 试剂(ml) 1 2 3 唾液 2 2 2 缓冲液 3（pH5.00） 3（pH6.80） 3（pH8.00） 1%淀粉 2 2 2 37℃水浴10min 碘液 1滴 1滴 1滴 现象 4观察激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响 取试管4支，编号1,2,3,4，按下表操作： 试剂 滴 1 2 3 4 1%淀粉 20 20 20 20 唾液 10 10 10 10 蒸馏水 6 — — — 1％氯化钠 — 6 — — 1％硫酸铜 — — 6 — 1％硫酸钠 — — — 6 37℃水浴5—10min 碘液 1滴 1滴 1滴 1滴 现象 实验结果及分析 思考题 影响酶促反应速度的因素有哪些？它们如何影响酶的活性？