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羧甲基壳聚糖衍生物的抗菌作用研究
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精品
前言
作为自然界中存在量仅次于纤维素的天然聚合物及其独特的聚阳离子特性 ,壳聚糖具有广阔的应用领域,例如在医药、生物、食品加工、污水处理等。壳聚糖是一种广谱抑菌剂,能有效抑制细菌和真菌的生长。此外,与一般抑菌剂相比,它具有抑菌活性高、广谱、杀灭率高及对哺乳动物细胞毒性低等优点。壳聚糖抑菌机理主要有如下两种:其一为壳聚糖和细胞膜中的必需微量金属阳离子选择性螯合,改变细胞的通透性,影响细胞内外物质的正常转运和代谢,从而达到抑菌的效果。另一机理为壳聚糖穿过细胞膜进入细胞基质与DNA结合,抑制DNA向RNA转录,通过干扰遗传物质的合成,影响细胞的分裂。壳聚糖具有良好的抑菌性,由于其只能溶解于酸性溶剂,这极大地限制了它的应用范围。因此,能溶解于酸性和碱性生理环境的壳聚糖衍生物将是一种应用广泛的生物杀菌剂[1]。
本实验主要以羧甲基壳聚糖为原料,合成羧甲基壳聚糖衍生物CMCT-Ag、 CMCT-Cu 、CMCT-Zn,研究了各种衍生物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抗菌作用,并以壳聚糖、羧甲基壳聚糖及苯甲酸钠为对照做比较。从实验中可以发现羧甲基壳聚糖衍生物有很强的抗菌作用。并从各种抗菌剂的抗菌比较中可以得到羧甲基壳聚糖的金属络合物有明显的抗菌作用,且随着络合率的增大抗菌作用增强,尤其以羧甲基壳聚糖银为代表。因此,羧甲基壳聚糖衍生物可以应用到各种领域,加大其生产,必将产生较大的经济效益和社会效益。
1 综述
1.1 国内外研究概况
1.1.1壳聚糖衍生物及其衍生物的研究意义
甲壳素又名几丁质、甲壳质、壳多糖、聚乙酰氨基葡萄糖等, 化学名为1, 4- 2- 乙酰氨基- 2- 脱氧- β- D- 葡聚糖, 是N- 乙酰基- D- 葡萄糖胺以β- 1, 4 键结合而成的直链多聚物。由法国学者于1811年从蘑菇中首先发现, 1823年由法国科学家欧吉尔从甲壳类昆虫翅鞘中分离并命名。广泛存在于甲壳纲动物虾、蟹的甲壳,昆虫的甲壳,真菌( 酵母, 霉菌)、藻类及植物的细胞壁中[2-3]。估计自然界年生物合成的量有近100亿之多, 仅次于纤维素。同时甲壳素也是自然界除蛋白质之外数量最大的含氮天然有机化合物[4],据此可以说明甲壳素的重要地位。壳聚糖(Chitosan)则是甲壳素脱去C2 乙酰基的产物,又名甲壳、脱乙酰甲壳素、可溶性甲壳素、聚葡萄糖胺等, 化学名为聚(1, 4)- 2- 氨基- 2- 脱氧- B- D- 葡萄叫壳聚糖, 脱乙酰基100%的也叫壳聚糖, 通常壳聚糖工业品的脱乙酰度65%~90%, 其中以70%~80% 最常见。由此可见, 甲壳素与壳聚糖的差别,仅仅是N- 脱乙酰度不同而已。实际上壳聚糖可视为甲壳素和壳聚糖两种单体单元的无规共聚物。要得到100%脱乙酰的壳聚糖, 必须用浓碱重复处理多次。壳聚糖含有游离氨基, 能结合酸分子, 是天然多糖中唯一的碱性多糖,也是少数具有正电荷的天然产物之一,这种独特的性质使其具有潜在的应用价值。甲壳素及其衍生物因其特有的理化性能, 使其在食品、纺织、印染、造纸、医药、环保及化工等行业有着广阔的应用前景。有关人类对甲壳素的认识从19世纪开始, 而我国只是在20 世纪80 年代才开始对甲壳素、壳聚糖的研究重视起来, 不过发展比较迅速。我国已成为世界上甲壳素/壳聚糖系列产品主要输出国家。甲壳素原料虾、蟹壳等原本是废弃物, 几乎成为环境污染源, 经过100 年间的不懈研究终将其变废为宝, 并成为跨世纪的全球性热门科研课题, 各国竞相开发出一系列的甲壳素类高科技产品。1991年, 日本、美国、欧洲的医学界和营养食品研究机构将其定义为继碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质之后的第六大生命要素, 欧洲甲壳素研究会也于1992年成立[5].
近年来,随着人们对安全无毒的天然防腐剂消费需求的增长,壳聚糖不同寻常的抑菌活性也逐渐成为研究的热点。有关壳聚糖抑菌作用的研究很多,也有将壳聚糖试用于水果、面包、肉制品、调味品、果汁等食品防腐保鲜的报道。壳聚糖是甲壳素脱乙酰基的产物,是一种天然的阳离子高分子多糖,对壳聚糖进行化学修饰即可得羧甲基壳聚糖(CMC),根据羧甲基的取代位置不同可以获得O一羧甲基壳聚糖、N一羧甲基壳聚糖和N,O一羧甲基壳聚糖3种产物。其中,O一羧甲基壳聚糖在比较宽的羧甲基化度范围内表现出较壳聚糖更好的抗菌性。从其本身结构来看,羧甲基壳聚糖是一种两性聚电解质,能有效的与金属离子进行络合。Ag﹢是一种广谱的杀菌剂,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有较好的抑制作用,Ag﹢在0.03~1ug/ml范围内便具有较好的杀菌作用[6]。因此,合成了羧甲基壳聚糖银等衍生物,它既具备了壳聚糖的安全无毒优势的同时也充分发挥了较强的抗菌作用。
1.1.2壳聚糖衍
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