ev病毒c亚型重组病毒样 ppt课件知识讲稿.pptVIP

七、电子显微镜 VLP 样本用0.5%水样乙酸双氧铀负染, 用Philips CM-12S 放射电子显微镜观察。 Figure 4. Electron microscopy of EV71 VLPs. Partially purified VLPs were negatively stained with 0.5% aqueous uranyl acetate and visualized by transmission electron microscopy. Bar = 50 nm. 八、VLP 免疫小鼠诱导出抗EV71特异的抗体反应 免疫之前, EV71 VLPs 与同样制备的阴性对照 (Sf9) 抗原与明矾(Pierce, Rockford, IL, USA)根据厂商说明，以体积比1:1混合，混合物含有VLPs (相当于 5 mgVP0) 或者 Sf9阴性溶解产物. 每组5只雌性 Balb/c 小鼠(6–8 weeks old) 以 0, 2 和5周次腹腔注射。每次免疫之前，收集血清样本， 在第七周老鼠被处死。血清保存在-80 ℃备用。 九、抗体测定： 用间接ELISA测定血清样本中抗-EV71抗体的反应性。 包被：灭活的EV71 (10 ng/孔)包被96-孔ELISA反应板 37℃3 h. 封闭：用 5% 奶粉 PBST 孵育 37 ℃ 1h. 加血清：用1%奶粉