红花7I｛鳖木SRAP反应体系的建立及优化-中南林业科技大学学报.PDF

No．5 第28卷第5期 中南林业科技大学学报 V01．28 2008年lO月 ofCentralSouth of Oct．2008 Journal UniversityForestryTechnology 文章编号：1673—923X(2008)05--0022—06 红花7I{鳖木SRAP反应体系的建立及优化 李达，熊兴耀，于晓英，彭尽晖，吴莉英，李炎林 (湖南农业大学园艺园林学院，湖南长沙410128) 摘 要： 为了获得红花橙木清晰的SRAP标记图谱，对红花橙木DNA的提取方法以及SRAP—PCR反应体系的影响因子进行了 初步探讨，筛选和建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP—PCR反应体系，同时提出了应用SRAP分子标记 构建红花橙木遗传图谱的可行性．最佳SPAR—PCR反应体系为：在50 mmol／t1L，dNTPs1．0mmol／tzL， pL的反应体系中，Mg”1．6 rain、 DNA模板150ng，DNA聚合酶3．6U，上下引物各0．20mmol／L．扩增程序为：94℃预变性4rain，反应前5个循环在94℃1 35℃1rain、72℃1min条件下运行，随后的30个循环复性温度提高到55℃，最后72℃延伸5min． 关键词： 生物技术I红花檐木；DNA；SRAP 中图分类号：Q789 文献标志码：A Establishmentand of Optimization SRAPReactionin chinensevar．rubrum SystemLoropetalum LIDa，XIONG Yan—lin Jin—hui，WULi—ying，LI Xing—yao，YUXiao—ying，PENG (SchoolofHorticultureand 410128，Hunan，China) Landscapes，HunanAgriculturalUniversity，Changsha Abstract：Toobtainclear of chinensevar．rubrum，this SequeneeRelatedAmplifiedPolymorphism(SRAP)fingerprintsLoropetalum researchedontheDNAextractionmethodandthe SRAP then a paper factors analysis，anddevelopedfeliable，effective