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宁夏大学大学生科技创新与人文社会科学 研究项目结题报告书 学 院： 生命科学学院 项目名称： 宁夏三种灌木叶片角质膜分离 及其结构特征研究 项目主持人： 马玲悦 指导教师： 彭 励 填报日期： 2013 年 3 月 28 日 教 务 处 制 一、项目结题简表 项目名称：宁夏三种灌木叶片角质膜分离及其结构特征研究 资 助 经 费 1600元 完成时间 2013年3月 成果形式 论文一篇 项 目 主 持 人 马玲悦 所在学院 生命科学学院 主要研究人员 姓 名 所 在 学 院 专 业 年、班级 承 担 主 要 工 作 许 晨 生命科学学院 生物科学 2010级 辅助承担角质膜分离的部分工作 杨晓琴 生命科学学院 生物科学 2010级 辅助承担扫描电镜的部分检测工作 二、项目主要研究内容及成果摘要： 1.内容 宁夏回族自治区地处西北内陆，干旱少雨，水资源严重缺乏，是我国水资源严重短缺的省区之一，解决水资源短缺和提高水资源利用效率已是迫在眉睫。 《宁夏回族自治区十一五科技发展规划》中分别把“水资源高效利用”及“植物种质资源研究开发与创新和优良新品种定向培育”列为优先发展主题，提出建立工业节水、城市节水和农业节水技术体系。而城市节水、农业节水技术体系都与生物节水理论密切相关。由此，提高植物水分利用率，挖掘植物自身的植物水分利用效率就显得尤为重要。 角质膜是覆盖在植物地上部叶片、花等器官表面的由脂肪族和酯类化合物等构成的连续的薄膜，大量研究表明，叶片角质膜对减少水分蒸发适应干旱环境，提高旱生植物水分利用效率等发挥着重要的作用，这种保护作用与角质膜的精细结构特别是其外层的蜡质形态结构具有密切的关系。2012年至2013年我们小组以分布在宁夏贺兰山东麓地区的蒙古扁桃、中部干旱带的沙冬青以及六盘山阴湿地区的靼鞑忍冬3种观赏灌木的叶片为研究对象，通过叶片角质膜的分离、角质膜形态及角质膜蜡质形态结构进行比较研究，深入认识不同生境下植物叶片角质膜的结构特征与耐旱性关系。 成果 （1）筛选出角质膜的最适分离条件，并成功获得出三种灌木叶片的角质膜； （2）完成了三种叶片形态结构比较； （3）完成3种叶片角质膜蜡质超微结构的观察； （4）撰写论文1篇，结题报告1份。 三、项目效果自我评价（包括预期目标、最终结果、研究过程、费用支出情况、心得体会等）： 1.完成了立项申请书的研究内容，实现了预期目标 本项目严格按照立项时所列实施方案进行，筛选出最适的角质膜分离方法，并通过扫描电镜的观察比较了分离出的角质膜表面蜡质结构与离体叶片表面蜡质结构，确定了沙冬青筛选出的分离条件对角质膜外侧蜡质晶体的基本结构无损伤，但鞑靼忍冬和蒙古扁桃角质膜外侧蜡质晶体的形态机构由于观察手段和制片技术的限制，未能观察到理想的结果，需要作为进一步研究。同时，通过传统石蜡切片及蜡质组化定位等方法比较了不同生境下3种观赏灌木叶片的形态结构特征及角质膜表面结构特征，所获得的成果具有一定的创新性。 2.取得的成果 （1）筛选出角质膜分离条件 本研究采用酶法分离技术，分别对果胶酶等反应体系进行了筛选，结果如下： = 1 \* GB3 \* MERGEFORMAT ①果胶酶反应温度　通过不同处理温度处理叶片的效果比较发现冬青叶片在20℃分离效果最好，而蒙古扁桃和鞑靼忍冬最适的果胶酶的反应温度均为30℃ = 2 \* GB3 \* MERGEFORMAT ②果胶酶酶解pH值 在同一温度条件下，分别采用不同pH值果胶酶溶液处理叶片，结果表明沙冬青、鞑靼忍冬均在pH为4.0和5.0的时候分离效果最好，而蒙古扁桃则在pH为5-6的情况下分离效果最好。 = 3 \* GB3 \* MERGEFORMAT ③果胶酶反应浓度 在同一温度和PH值条件下，分别设置果胶酶溶液为20%、40%、60%、80%、100%五个不同浓度，通过比较不同的果胶酶溶液处理叶片的效果，发现沙冬青在浓度为20%-40%的时分离效果好，鞑靼忍冬在40%-60%的浓度下分离效果好，蒙古扁桃的最适分离酶液浓度是60%。 = 4 \* GB3 \* MERGEFORMAT ④果胶酶酶解反应时间 根据筛选的果胶酶最适反应条件，将不同材料的叶片放入反应溶液中，，观察各个处理组角质膜分离情况，记录其角质膜脱离叶片的时间。通过分离统计发现，沙冬青最容易分离，其次是蒙古扁桃，最长时间的为鞑靼忍冬叶片。它们分别为15天、35天和45天。 获得了3种灌木叶片解剖