安徽省大口黑鲈人工提早繁殖技术的研究及其胚胎发育观察.docVIP

安徽省大口黑鲈人工提早繁殖技术的研究及其胚胎发育观察 　　摘要 于2014年在安徽省青阳县进行了大口黑鲈人工提早繁殖的研究，并对其胚胎发育整个过程进行观察和记录，结果表明：2012年12月，将1龄的大口黑鲈从广东省运至安徽省青阳县，专塘培养至2013年12月，转至温室大棚培育至翌年4月初，成熟率达80%；性腺成熟的亲鱼经催产，平均产卵率达78%，受精率达85%，孵化率达68%。大口黑鲈胚胎发育从受精卵到孵化出膜可分为20个时期，在水温18.6～20.6 ℃条件下，胚胎发育共历时58 h 20 min，发育总积温为1 207.50 h?℃。 　　关键词 大口黑鲈；人工提早繁殖；胚胎发育；观察；安徽省 　　中图分类号 S917 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）01-0272-02 　　大口黑鲈（Micropterus salmoides）也称加州鲈，属鲈形目、太阳鱼科、鲈鱼属，原产于美国加利福尼亚州[1]。我国台湾省于20世纪70年代引进，并于1983年人工繁殖获得成功[2]，同年大口黑鲈进入广东省，随后逐渐向江苏、山东、浙江、安徽和湖北等地引进。经过30余年的发展，大口黑鲈己成为国内重要的淡水养殖品种之一[3]，具有广阔的市场前景[4]。目前，对大口黑鲈的疾病预防[5]、饲料营养需求[6]、微卫星[7]及遗传多样性[8]等方面有很多研究。 　　青阳县（皖江特种养殖有限公司）有安徽省最大的大口黑鲈养殖基地，养殖水面313.33 hm2，年产量约3 500 t，产值近1亿元。目前，安徽省大口黑鲈的苗种一直依赖从广东购进，没有开展人工繁殖，从而抑制了安徽地区大口黑鲈养殖业的发展。因此，为突破早繁的瓶颈，从广东省引进大口黑鲈亲本，在安徽省进行强化培育，建立温室大棚，提早繁殖，采用人工催产、自然受精孵化、卤虫开口等技术措施，初步取得成功。 　　1 材料与方法 　　1.1 亲鱼培育与选择 　　2012年12月从广东省购买当年大口黑鲈商品鱼，在安徽省养殖基地池塘内培育至2013年12月，然后转入透光温室大棚内，雌雄分池培育，池中放养花白鲢饵料鱼，并适当投喂冰鲜鱼。 　　2014年3月底至4月初，挑选肥满度好、个体大、体型佳、体色鲜亮、无伤病的的成熟亲本进行人工催产。繁殖季节成熟的雌鱼体形较粗短，体色较淡，鳃盖部光滑，胸鳍呈圆形，腹部膨大，卵巢轮廓明显，腹部柔软，生殖孔稍凸，产卵期呈红润状，上有2个孔，前、后分别为输卵管和输尿管开口；雄鱼较狭长，体色较深，鳃盖部略粗糙，胸鳍较狭长，雄鱼生殖孔凹陷，只有1个孔，轻压腹部有乳白色精液流出，且精液入水即散开为好。 　　1.2 催产与受精 　　采用一针注射法，用激素LRH-A2、HCG和DOM 3种激素组合对大口黑鲈胸鳍基部进行注射。注射剂量：1 kg雌鱼注射5 mg DOM+5 μg LRH-A2+1 500 IU HCG，雄鱼剂量减半。LRH-A2、HCG和DOM均由宁波市三生有限公司生产。亲鱼注射后，放入池塘中，在池边水深30 cm左右处安放沸水浸泡过的柳树根和棕榈片制作的鱼巢。 　　1.3 孵化 　　将受精卵连同柳树根、棕榈一起带水移至直径为3 m、水深0.6 m的孵化池内，流水充氧孵化。每天在鱼巢周边泼洒亚甲基蓝防治水霉。 　　1.4 观察与取样 　　亲鱼发情时，会在水面游动，溅起水花；亲鱼尾鳍露出水面并不断摆动，身体倾斜，头部朝下，此时守候在池边，定时查看各柳树根和棕榈上有无受精卵。发现受精卵后，立即取部分卵于培养皿中，并在显微镜底下连续观察。观察时，用显微镜自带软件Motic Plus 2.0和佳能1 600万像素数码相机通过目镜进行拍照。以样本中60%胚胎发育到某个时期的时间作为该时期的发育时间。 　　2 结果与分析 　　2.1 人工繁殖情况 　　在青阳县共催产3次，催产时亲鱼平均成熟率达80%，平均产卵率达78%，平均受精率85%，平均孵化率68%。第1批繁殖获得鱼苗50万尾，第2批获得鱼苗190万尾，第3批出苗65万尾。3次催产的具体效果见表1。 　　2.2 胚胎发育观察 　　2.2.1 胚胎发育时序。大口黑鲈胚胎发育整个过程可划分为25个时期，在水温为18.6～20.6 ℃条件下，历时约58 h 20 min，胚胎发育总积温为1 207.50 h?℃。从受精卵到出膜各个发育时期的时序及特征见表2。 　　2.2.2 胚胎发育过程中的外部形态特征。受精卵胚盘形成期：受精卵大口黑鲈受精卵呈圆球形，为淡黄色、半透明黏性卵，内有橙黄色油球1个。卵径1.1～1.3 mm，吸水后1.2～1.5 mm。受精时，卵子由于精子的进入而激活，此时，原生质向动物极集中，受精40 min左右时，原生质形成丘状隆起，即为胚盘（图1a）。