蛋白二联亚单位疫苗的研究-西北农林科技大学学报.PDF

第 卷 第 期 西北农林科技大学学报自然科学版 年 月 网络出版时间 网络出版地址 蛋白和 蛋白二联 亚单位疫苗的研究 刘国阳 华 涛 乔绪稳 唐 波 常 晨 侯继波 李锦春 张道华 安徽农业大学 动物科技学院安徽 合肥 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏 南京 摘 要 目的研制 基因编码的 蛋白与 结构蛋白二联亚单位疫苗方法设 计截去 信号肽序列的 蛋白氨基酸序列和 蛋白氨基酸全序列分别进行大肠杆菌偏嗜密码子优化构 建重组表达质粒利用大肠杆菌表达系统表达出可溶性的 蛋白和 重组蛋白将重组蛋白纯化后分别与 佐剂混合制备单苗和二联亚单位疫苗免疫 小鼠同时设立 空白对照和大肠杆菌 对照首免 后 进行加强免疫利用 比色法细胞中和试验法和 法对免疫小鼠淋巴细胞的转化功能及细胞因子 水平免疫后中和抗体效价以及 抗体水平进行检测小鼠二免 后进 行 和 混合攻毒利用 法定量测定攻毒后小鼠脾脏的病毒含量结果成功构建了重组 质粒 和 表达出可溶性蛋白 和 经 颗粒和饱和硫酸铵沉淀法纯化蛋白获