青霉菌的原生体制备技术研究.docVIP

青霉菌的原生质体制备技术研究 薛康平 任富亮 邢建广 王越甲 摘要：实验证明青霉菌原生质体形成最佳条件是用马铃薯液体培养基，液体震荡培养温度28℃, 培养42h，蜗牛酶的浓度为5mg/ml，酶解3.5h ，酶解温度33 关键词：青霉菌 原生质体 蜗牛酶 1 原生质体简介 细胞壁被酶水解剥离，剩下有原生质膜包围着的原生质部分称为原生质体Weibull 等于1953年首次用溶菌酶处理巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)细胞获得原生质体。其形状随不同菌类而异，革兰氏阴性菌经酶水解后细胞壁尚有残余部分，细胞具刚性，保持球形，称为原生质球或球质体；革兰氏阳性菌细胞壁去除彻底，失去刚性，原生质体类似于球体。不论原生质体或原生质球都基本保持原细胞结构，活性和功能，只是因为它们去掉了细胞壁，对渗透压特别敏感。 原生质体诱变是一种行之有效的育种新技术，它是以微生物原生质体为育种材料，采用物理或化学诱变剂处理，然后分离到再生培养基中再生，并从再生菌落中筛选高产突变菌株。Kim等于1983年首先采用该法诱变玫瑰色小单孢菌（Micromonospora rosaria）取得成功以来，应用逐渐广泛，已在抗生素，酶制剂，有机酸及维生素等高产突变株的选育中起到重要的作用。 丝状真菌原生质体的提取方法有三种：机械法，非酶分离法和酶法。采用前二种方法制备的原生质体效果差，活性低，仅适用于一些特定