白念珠菌1α脱甲基酶K143Q氨基酸置换与氟康唑耐药形成的相关性.PDF

·７５０· 检验医学２０１４年７月第２９卷第７期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｕｌｙ２０１４，Ｖｏｌ２９．Ｎｏ７． 文章编号：１６７３８６４０（２０１４）０７０７５００５　　中图分类号：Ｒ４４６．５　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１４．０７．０１４ 白念珠菌１４脱甲基酶Ｋ１４３Ｑ氨基酸置换与 α 氟康唑耐药形成的相关性研究 １ ２ １ １ ３ 刘锦燕 ，　倪培华 ，　史　册 ，　魏　冰 ，　项明洁 （１．上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院放免检验科，上海２０００２０； ２．上海交通大学医学院附属瑞金医院检验系，上海２０００２５； ３．上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科，上海２０００２０） 　　摘要：目的　研究临床耐氟康唑白念珠菌 １４脱甲基酶的Ｋ１４３Ｑ氨基酸置换与氟康唑耐药形成的关系。 α 方法　运用体外定点突变技术构建ＥＲＧ１１基因Ａ４２７Ｃ突变型重组质粒，并利用酶切、连接构建ＹＥＳ２／ＣＴ酵母 表达质粒。通过构建成的表达质粒在酿酒酵母中的异源性表达及体外药物敏感性表型的检测，分析其致Ｋ１４３Ｑ 氨基酸置换与白念珠菌对氟康唑产生耐药的关系。结果　真菌体外药物敏感性表型检测显示，含氨基酸置换的 表达质粒转染于酿酒酵母ＩＮＶＳｃ１后，氟康唑最低抑菌浓度（ＭＩＣ）增加１６倍。结论　Ｋ１４３Ｑ可增强白念珠菌对 氟康唑的耐药性。 关键词：白念珠菌；氟康唑；ＥＲＧ１１基因；错义突变；定点突变技术；酿酒酵母；异源性表达 　　ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＫ１４３Ｑａｍｉｎｏａｃｉｄｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｉｎ１４ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅａｎｄｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ α １ ２ １ １ ３ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ　ＬＩＵＪｉｎｙａｎ，ＮＩＰｅｉｈｕａ，ＳＨＩＣｅ，ＷＥＩＢｉｎｇ，ＸＩＡＮＧＭｉｎｇｊｉｅ．　（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＲａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙａｎｄＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＬｕｗａｎＢｒａｎｃｈ，ＲｕｉｊｉｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００２０，Ｃｈｉｎａ；２．ＦａｃｕｌｔｙｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＲｕｉｊｉｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００２５，Ｃｈｉｎａ；３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＲｕｉｊｉｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏｔｏｎｇ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００２０，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｖｅｒｉｆｙｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｏｆＫ１４３Ｑａｍｉｎｏａｃｉｄｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎｉｎ１４ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅａｎｄ α ｆｌｕｃｏｎｚｏｌｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＴｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｍｕｔａｎｔｐｌａｓｍｉｄｗｉｔｈＡ４２７ＣｉｎＥＲＧ１１ｇｅｎｅｗａｓ ｆｉｒｓｔｌｙｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｂｙｓｉｔｅｄｉｒｅｃｔｅｄｍｕｔ