白藜芦醇通过激活去乙酰化酶1／腺苷一磷酸激活的-动物营养学报.PDF

动物营养学报２０１７，２９（１２）：４３９８⁃４４０７ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１７．１２．０２０ 白藜芦醇通过激活去乙酰化酶 １／ 腺苷一磷酸激活的 蛋白激酶信号通路影响牛脂肪细胞凋亡 １，２ １，２ ∗ １，２ １，２ １，２ 成海建 　 游　 伟 　 靳　 青 　 刘倚帆 　 万发春 　 １，２ １，２ １，２ １，２ １，２ ∗∗ 宋恩亮 　 刘桂芬 　 谭秀文 　 张相伦 　 刘晓牧 （１．山东省农业科学院畜牧兽医研究所，济南 ２５０１００；２．山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，济南 ２５０１００） 摘　 要： 本试验旨在研究植物提取物白藜芦醇（ＲＥＳ）对牛皮下脂肪细胞凋亡率以及去乙酰化 酶１（ＳＩＲＴ１）／ 腺苷一磷酸激活的蛋白激酶（ＡＭＰＫ）信号通路关键因子的ｍＲＮＡ和蛋白质表达 量的影响。 选取１８ 月龄鲁西黄牛的皮下前体脂肪细胞，在细胞分化的第０ 天，更换为ＲＥＳ 浓度 分别为０（对照）、１００、２００ 和４００ μｍｏｌ／ Ｌ 的培养液处理４８ ｈ，每组设３ 个重复。 应用Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２ 染色检测细胞凋亡的形态学变化，流式细胞分析仪检测细胞凋亡率，荧光定量 ＰＣＲ （ｑＰＣＲ）和免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ）分别检测ＳＩＲＴ１／ ＡＭＰＫ信号通路上的关键因子ＳＩＲＴ１、 － ＡＭＰＫα、叉头转录因子 １（ＦｏｘＯ１）、Ｂ 细胞淋巴瘤／ 白血病 ２（Ｂｃｌ⁃２）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白 － 酶 ３（ｃａｓｐａｓｅ⁃３）、促凋亡蛋白Ｂｃｌ⁃２相关Ｘ 蛋白（Ｂａｘ）的ｍＲＮＡ 和蛋白质表达量，并利用油红 Ｏ 染色鉴定脂肪细胞。 结果表明，与对照组相比：不同浓度ＲＥＳ 处理后的牛皮下脂肪细胞凋亡 率均极显著增高（Ｐ＜０．０１）；不同浓度ＲＥＳ 处理后的ＳＩＲＴ１、ＡＭＰＫα、ｃａｓｐａｓｅ⁃３、Ｂａｘ 的ｍＲＮＡ表 达量均显著或极显著提高（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），Ｂｃｌ⁃２ 的ｍＲＮＡ 表达量极显著降低（Ｐ＜０．０１）； 不同浓度ＲＥＳ处理后的ＳＩＲＴ１、ＡＭＰＫα、ｃａｓｐａｓｅ⁃３ 的蛋白质表达量均显著或极显著提高（Ｐ＜ ０．０５或Ｐ＜０．０１）；２００和４００ μｍｏｌ／ Ｌ ＲＥＳ处理后，ＦｏｘＯ１的ｍＲＮＡ和蛋白质表达量显著或极显 著提高（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），Ｂａｘ 的蛋白质表达量极显著提高（Ｐ＜０．０１），Ｂｃｌ⁃２ 的蛋白质表达量 极显著降低（Ｐ＜０．０１）。 １００ μｍｏｌ／ Ｌ ＲＥＳ 处理后时，ＦｏｘＯ１ 的ｍＲＮＡ 和蛋白质表达量以及 Ｂｃｌ⁃２、Ｂａｘ 的蛋白质表达量均与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。 由此可见，ＲＥＳ通过激活ＳＩＲＴ１／ ＡＭＰＫ信号通路，同时激活通路下游的ＦｏｘＯ１，促进了牛皮下脂肪细胞的凋亡，为通过营养调控 技术降低牛皮下脂肪沉积提供了一定的理论基础。 关键词： 去乙酰化酶１；腺苷一磷酸激活的蛋白激酶；叉头转录因子 １；白藜芦醇；牛；脂肪细胞； 凋亡 中图分类号：Ｓ８２３　 　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１７）１２⁃４３９８⁃１０ ［１］ 　 　 脂肪细胞凋亡，即能量储存的死亡。 通过凋 共同维持机体细胞数目的恒定 。 对脂肪细胞凋 亡来调整脂肪细胞的数目被认为是脂肪组织生长 亡过程及其调节机制进行深入研究，为治疗人类 和分化过程中维持正常生理机能所必需的，细胞 肥胖相关疾病、控制动物体脂沉积进而改善肉品 凋亡存在整个脂肪细胞分化过程中，和增殖