第五章-发酵过程及控制.pptVIP

此外，温度还合影响生物合成的方向。 微生物的发酵是在一定条件下进行的，其内在代谢变化规律是通过各种检测装置测出的参数反应出来的。这样就可在严格监视下进行发酵，使产物的产量达到理想的程度。与微生物发酵有关的参数，可分为物理、化学和生物三类。这里介绍各个参数的意义及作用。 化学、生物参数 生物热随菌株培养基成分和发酵时期的不同而不同。一般，菌株对营养物质利用的速率越大，培养基成分越丰富，生物热也就越大。发酵旺盛期的生物热大于其他时间的生物热。 补充微生物能源和碳源的需要。 补充菌体所需要的氮源。 补充微量元素或无机盐。 3、补料的内容 控制微生物的中间代谢，使之向着有利于产物积累的方向发展。 为实现这一目标，在中间补料控制时，必须选择恰当的反馈控制参数和补料速率。 4、补料的原则 大多数补料分批发酵均补加生长限制性基质 以经验数据或预测数据控制流加； 以pH、尾气、溶氧、产物浓度等参数间接控制流加； 以物料平衡方程，通过传感器在线测定的一些参数计算限制性基质的浓度，间接控制流加； 用传感器直接测定限制性基质的浓度，直接控制流加。 5、补料控制的策略 6、补料控制参数的选择 为了有效地进行中间补料，必须选择恰当的反馈控制参数，以及了解这些参数与微生物代谢、菌体生长、基质利用以及产物形成之间的关系。采用最优的补科程序也是依赖于比生长曲线形态、产物生成速率及发酵的初始条件等情况。因此，欲建立分批补料培养的数学模型及选择最佳控制程序都必须充分了解微生物在发酵过程中的代谢规律及对环境条件的要求。 例如，在谷氨酸发酵过程中的某阶段，生产菌的摄氧率和基质消耗速率之间存在着线性关系。 连续补料和分批补料发酵的比较 7、补料速率的确定 优化补料速率也是补料控制中十分重要的一环，因为养分和前体需要维持适当的浓度，而它们则以不同的速率被消耗，所以补料速率要根据微生物对营养等的消耗速率及所设定的培养液中最低维持浓度而定。 例如，用连续培养方法测定了在不同比生长速率下青霉素生产菌产黄青霉的碳、氯、氧、磷、硫和乙酸盐及菌最适生长所需的各种基质的补料速率。 第五节 发酵终点判断 不同类型的发酵，要求达到的目标不同，因而对发酵终点的判断标准也应有所不同。 对发酵及原材料成本占整个生产成本主要部分的发酵品种，主要追求提高生产率(kg/m3·h)，得率(kg产物/kg基质)和发酵系数(kg产物/罐容积m3·发酵周期h) 下游提取精制成本占主要部分和产品价格比较贵，除了要求高的产率和发酵系数外，还要求高的产物浓度。 提高产率就必须缩短发酵周期，这就要在产物合成速率较低时放罐，延长发酵虽然略能提高产物浓度，但生产率下降，且消耗动力，成本提高 一、经济因素 以最低的成本来获得最大生产能力的时间为最适发酵时间。 二、产品质量因素 放罐时间太早，会残留过多的养分，对提取不利；放罐时间太晚，菌体自溶，影响过滤。这些都可能使产物的质量下降，杂质含量增加。 三、特殊因素 如染菌情况，应适当处理，适时放罐。 判断放罐指标： 产物浓度、过滤速度、氨基氮、菌丝形态， pH、培养液的外观、粘度 在液体振荡培养(或深层通气培养)中，以菌丝干重作为衡量生长的指标，可获得如图所示的生长曲线。在静止培养中也可获得类似的生长曲线。 丝状真菌的生长过程大致可分为；（1）生长延滞期；（2）迅速生长期；（3）衰退期。 （1）生长延滞期 造成生长延滞的原因有两种：一是孢子萌发前的真正的延滞期，另一种是生长已开始但却无法测量。对真菌的生长延滞期尚未作过仔细研究。 （2）迅速生长期 此时菌丝体干重迅速增加，其立方根与时间成直线关系。因为真菌不是单细胞，其繁殖不以几何倍数增加，故而没有对数生长期。真菌的生长常表现为菌丝尖端的生长和菌丝的分枝，因此受到邻近细胞竞争营养物质的影响。尤其在静止培养时，许多菌丝在空气中生长，必须从邻近的细胞吸收营养物质供生长需要，在迅速生长期中，碳、氮、磷被迅速利用，呼吸强度达到顶峰，代谢产物如酸类可出现或不出现。静止培养时，在迅速生长期的后期的菌膜上格出现孢子。 （3）衰退期 真菌生长进入衰退期的标志，是菌丝干重下降。一般是在一短期内失重很快，以后不再变化。但有些真菌则发生菌丝体自溶，由于其自身所产生的酶类催化几丁质、蛋白质、核酸等分解而释放出氨、游离氨基酸、有机磷化物和有机硫化合物等。处于衰退期的菌丝体的细胞，除顶端较幼细胞的原生质比较稠密均匀外，大多数细胞都出现大的空泡。 生长的停止由以下两种因素之一所决定。在高浓度培养基中，可能是因为有毒代谢产物的积累而阻碍生长，如在高浓度碳水化合物的培养基中可积累有机酸；在含有机氮高的培养基中可积累氨。多数次生物质，如抗生素等，也是在此时合成的。在较稀释的、营养物质平衡良好的培养