产气荚膜梭菌的基因分型及地衣芽孢杆菌对鸡坏死性肠炎回肠菌群的影响-预防兽医学专业论文.docxVIP

朋川农业大学硕士学位论文 朋川农业大学硕士学位论文 一川川川 一川川川的 。 川川F肌A肌- 本人郑重声明:所虽交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得 的成果。尽我所知，除了文中特别加以标液和致谢的地方外，学位论文中不包含其他 个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育 机构的学位或证书所使用过的材料。与我叫-同工作的同志对本研究所做的任何贡献均 巳在论文中作了明确的说明井表示了谢意。 研究生签名:切肖 ìV {D年 d月字?日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不 同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部成部分内容。 川唰 唰 A 川唰 唰 A呻 川川川鸣，伽 唰唰州内， 唰唰 唰 AE 喇喇喇nu my 导师签名:倒似  bc 年{月)，}日 )v ，()年 6 月 νγ 日 ‘· 四川农业大学硕士学位论文 四川农业大学硕士学位论文 中文摘粟 试验从不同日龄健康鸡群的嗦囊、十二指肠、胆囊、空肠、凹肠和商肠内窑物中 分离产气英膜梭菌，确定其基因型。此外，从健康鸡回肠分离筛选到一株对产气英膜 梭菌具有良好拮抗性、耐热、耐酸和耐胆盐的芽抱杆菌。最后，将分离的芽础杆菌用 于动物试验，研究其对产气爽膜梭菌引起的坏死性肠炎鸡群生长性能、免疫器官指数、 回肠菌群及其多样性的影响。其主要内容包括: 1.产气爽膜梭菌的分离鉴定:采用 CW 卵黄卡那霉素和紫牛乳培养基，从 21、 28、35、42 、49 日龄健康鸡群的组织内容物中分离，其中十二指肠、胆囊、空肠、 回肠内容物未分离到产气爽膜梭菌，嗦囊和窗肠的内容物分离得到 27株产气爽膜梭 酶，检出率为 9.0% 。 2. 产气英膜梭酶的基因型:分离的 27 株产气爽膜梭菌经 Multi-PCR 都只扩增 出 α 条带，毒素基因分型结果均为 A 型。 REP-PCR 和 ERIC-PCR 两种分型方法均表 明不同日龄、不同组织来源的产气爽膜梭陶亚型差异明显，而同一日龄、相间组织的 亚型较单一，交又有少数其他亚型. 3. 芽础杆菌的筛选:从健康鸡空肠、四肠、窗肠内容物中分离到 5 株芽抱杆菌(K1， 叫，险， Ml M2) 经筛选得到耐受性较好的屿，其分子生物学鉴定为地衣芽抱杆 菌。通过代谢产物抗病原微生物的生物学性能试验，发现 H2 具有很好的抑菌性能， 其体外抑菌成分主要是酸性依赖物质。 4. 动物试验: 购买健康 1 日龄铁脚麻 135 羽，随机分成 9 组。 1 组是空白对照， 不进行感染。 2 到 9 组均在 15 日龄时每只鸡灌喂 lmL球虫卵囊 (100 万个1m!)，17-20 日龄每天海喂产气爽膜梭菌 lmL CVCC2030( 1.0x 108CFU/mL) ，建立感染模型。3、4、 5 为预防组，分别在基础日粮中添加 0.05% 、0.1%、0.2%菌粉 1 (含芽抱杆菌 H2 活 0菌数1.0xl09CFU/g) 0 6、7、8 为治疗组，在 0-21 日龄饲喂基础日粮中添加 0.05%的 商粉 1 ，21 日龄后分别在基础日粮中添加 0.1%、 0.2% 、0.4%菌粉 II (含芽抱杆菌 H2 活菌数1.0xl010 CFU/g) ，9 组在基础日粮中添加 0.1%盐霉素作为治疗对照组。 (1)生长性能: 28 日龄时添加芽抱杆菌预防、治疗感染鸡模型和空白组的末期 体重、平均日增熏均比感染组高，差异极显著 (PO.OI); 料重比比感染组低，差异极 显著(PO.Ol)。其中4、8 组效果最明显。 (2) 免疫器官指数: 28 日龄时 3、4、5 组法氏囊指数、胸腺指数、脾脏指数与 四川农业大学硕七学位论文 四川农业大学硕七学位论文 感染细的差异极跟著 (PO;Ol) ，4 组脾脏指数与 3、5 组的差异显著 (P0.05) ，说明 添加 0.1%菌粉 I 在基础日粮中对提高肉鸡免疫器官指数布效。 6、7、8 组胸腺指数、 脾脏指数与感染组的差异极显著 (PO.Ol )，法氏囊指数与感染组的差异显著 (P0.05)o 9 组法氏囊指数、胸腺指数、脾脏指数与感染组的差异极显著 (PO.Ol) ， 与空白组的差异不显著 (P 0.05)。 (3)回肠菌群: 28 日龄时， 3、4、5 组产气爽膜梭商、大肠杆菌、肠球菌和总 需氧菌数量显著下降 (P0.05)，乳酸杆菌、双歧杆菌、类杆菌和总厌氧菌数量显著 升高 (P0.