病原学[1-12]一、概述.PDF

病原学［1-12］ 一、概述 2002 年11 月在我国广东省部分地区出现的SARS，在经历了两个多月的始发 期后,扩散到我国内地24 个省、自治区、直辖市。在全球共波及亚洲、欧洲、美 洲等29 个国家和地区。自2003 年 1 月以来，SARS 疫情引起了众多中外科学家 的关注。作为疫情的首发地，中国科学家在排除了大量常见病因后，将目光集中 到“新病原”的寻找上。2003 年 3 月 17 日，世界卫生组织（WHO）建立了全球 网络实验室，开始了SARS 病原的联合攻关。经过全球9 个国家13 个网络实验室 的科学家从病毒形态学、分子生物学、血清学及动物实验等多方面研究，4 月16 日WHO 在日内瓦宣布，一种新的冠状病毒是 SARS 的病原，并将其命名为 SARS 冠状病毒（SARS-CoV）。 经典冠状病毒感染主要发生在冬春季节，广泛分布于世界各地。该病毒包括 三个群，第一、二群主要为哺乳动物冠状病毒，第三群主要为禽类冠状病毒。人 冠状病毒有两个血清型（HCoV-229E, HCoV-OC43）, 是人呼吸道感染的重要病原， 人类20%的普通感冒由冠状病毒引起。冠状病毒也是成人慢性气管炎急性加重的 重要病因之一。基因组学研究结果表明，SARS-CoV 的基因与已知三个群经典冠 状病毒均不相同，第一群病毒血清可与SARS-CoV 反应，而SARS 病人血清却不能 与已知的冠状病毒反应。作为一种新的冠状病毒，根据无根进化树分析，有人建 议将SARS-CoV 归为第四群（图1）。最近，有人对SARS－CoV 和已知的三个群经 典冠状病毒通过有根进化树分析，认为虽然SARS－CoV 与已知的三个群经典冠状 病毒都有区别，但与第二群的关系最近，不能将其列为独立的一群，而应该列为 第二群里的一个亚群（图2），原来的第二群冠状病毒可称为2a 亚群，SARS-CoV 称为2b 亚群。 第 1 页 图1 冠状病毒无根进化树分析 图2 冠状病毒有根进化树分析 二、形态结构 SARS-CoV 属冠状病毒科冠状病毒属，为有包膜病毒，直径多为60～120 nm， 包膜上有放射状排列的花瓣样或纤毛状突起，长约20 nm 或更长，基底窄，形似 王冠，与经典冠状病毒相似。病毒的形态发生过程较长而复杂，成熟病毒呈圆球 形、椭圆形，成熟的和未成熟的病毒体在大小和形态上都有很大差异，可以出现 很多古怪的形态，如肾形、鼓槌形、马蹄形、铃铛形等（图 3），很容易与细胞 器混淆。在大小上，病毒颗粒从开始的400 nm 减小到成熟后期的60～120 nm。 在病人尸体解剖标本切片中也可见到形态多样的病毒颗粒。 A B C D 100 nm 100 nm 200 nm 500 nm 图3 SARS-Cov 的多形性（A、B 为负染电镜观察结果，C、D 为超薄切片电镜观察结果，B、D 示病毒的多形 性） 三、生物学特性 病毒在细胞质内增殖，由RNA 基因编码的多聚酶利用细胞材料进行RNA 复制 和蛋白合成，组装成新病毒并出芽分泌到细胞外。与以往发现的冠状病毒不同， 利用Vero-E6 或Vero （绿猴肾细胞）细胞很容易对SARS-CoV 进行分离培养, 病 毒在37℃条件下生长良好，细胞感染24 小时即可出现病变，可用空斑进行病毒 第 2 页 6 滴定，早期分离株的培养滴度一般可达1×10 pfu/ml 左右。在RD （人横纹肌肿 瘤细胞）、MDCK （狗肾细胞）、293 （人胚肾细胞）、2BS （人胚肺细胞）等细胞系 上也可以培养，但滴度较低。 室温24℃条件下，病毒在尿液里至少可存活10 天，在腹泻病人的痰