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- 2018-10-27 发布于山东
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常见的磁性微球分离技术与离子交换色谱
《磁性微球与离子交换分离纯化生物大分子》
Part1
基于磁性微球吸附的DNA纯化
Part2
离子交换色谱在蛋白质分离中的应用
磁性微球吸附纯化DNA
从复杂生物样品中分离纯化核酸或者制备核酸模板是许多分子生物学技术中的关键步骤。由于样品基质中存在大量的细胞裂解产物如蛋白质和其他杂质,它们可能抑制下游处理中使用的聚合酶和限制性内切酶的活性,也可能导致目标核酸的降解,因此,在进行核酸测序、扩增、杂交、酶切等操作之前都需要首先采取适当的方法将核酸从混合物中分离出来。常规的核酸提取方法涉及细胞裂解、有机溶剂萃取、沉淀和离心等步骤。这个过程费时费力,不易自动化。
而新近发展起来的基于磁性微粒的固相提取方法使得核酸纯化过程大为简化,已经在欧美国家获得了广泛的应用!
磁性微球吸附纯化DNA
种类大致以下几种:
二氧化硅磁性微球
脲醛树脂磁性微球
聚苯乙烯磁性微球
四氧化三铁磁性纳米微球
g-Fe2O3磁性微球
磁性微球吸附纯化DNA
原理
大多数的磁性微球分别以球形脲醛树脂 、 二氧化硅 和 聚苯乙烯为基质,通过在其中均匀分散纳米磁性氧化铁制备而成,具有粒径分布均匀、磁场中沉降速度一致和超顺磁响应性等特点。在磁性微球表面通过化学修饰结合上一系列不同的化学官能团及具有特异性的抗体、蛋白和核酸,可应用于核酸纯化、细胞筛选、免疫分析、临床诊断等多个领域,是医学、分子生物学研究中不可或缺
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