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- 2018-10-29 发布于安徽
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实验一 卷心菜中过氧化物酶热稳定性的初步研究
实验原理
果蔬中的过氧化物酶(peroxidase)往往具有较高的热稳定性,对果蔬进行热烫处理时,常以过氧化物酶是否失活作为热烫是否充分的标准。许多研究表明果蔬中的过氧化物酶有热稳定和热不稳定两部分。这两部分的比例取决于果蔬的品种和热烫处理的温度。
过氧化物酶催化的典型反应为:H2O2+AH2→A+2H2O。
AH2是无色的还原性化合物,如果它经过氧化转变成有色的A,那么反应体系在特定波长下的吸光值就会随反应进行而增加。因此,可以用分光光度法测定过氧化物酶的活力。
试剂和仪器
试剂:0.05mol/L磷酸盐缓冲液pH7.0,含1.0mol/L NaCl(缓冲液Ⅰ)、0.1mol/L磷酸盐缓冲液pH7.0(缓冲液Ⅱ)、1%邻苯二胺-乙醇溶液、0.3%过氧化氢溶液
仪器:组织捣碎机、抽滤装置、水浴锅、721分光光度计(含比色皿)、秒表、常规玻璃仪器
实验步骤
从卷心菜中提取过氧化物酶
125g卷心菜+125mL缓冲液Ⅰ
↓ 均质(20000rpm,2min)
匀浆
↓ 抽滤
液体
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