食品中三聚氰胺的检测方法-(精选·公开·课件).ppt

食品中三聚氰胺的检测方法 一、关于三聚氰胺 化 学 名 ：1,3,5-三氨基-2,4,6-三嗪 俗称 “蛋白精” 主要用途： 三聚氰胺甲醛树脂的原料 涂料化工上交联剂 阻燃剂、清洁剂等 二、理化性质 无色单斜棱结晶 无气味 低毒 常温下在水中的溶解度为 3.1 g/L 三聚氰胺呈弱碱性 pH 值为 8 能与各种酸反应生成三聚氰胺盐 在强碱或强酸液中能发生水解 氨基逐步被羟基取代 生成三聚氰酸 三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺 三、毒奶粉事件 1、为什么奶粉中加入三聚氰胺？ 蛋白质的含量是奶粉质量的主要标志之一 奶粉中加入三聚氰胺（含氮量66.6%）可以在检测蛋白质的时候显示其氮含量很高 1公斤稀释奶中自然溶入的3.3克三聚氰胺 成本仅为4分钱 1公斤的牛奶的市场收购价约3.0元 2、长期摄入三聚氰胺的危害 动物长期摄入会造成生殖 泌尿系统的损害 肾部结石 并可进一步诱发膀胱癌 添加到牛奶中后会产生三聚氰酸 与三聚氰胺结合在一起后形成网络状结晶 微溶于水 遇胃酸溶解 在肾小管中再次结晶 长期会形成肾结石 3、人体能承受三聚氰胺最大量 美国食品及药品监督管理局的标准：三聚氰胺每日可容忍摄入量为0.63毫克/公斤体重 也就是说一个60公斤的成年人每日可容忍摄入量为37.8毫克 三鹿的问题奶粉则达到了2563毫克/公斤 3、为什么会“大头娃娃”？ 婴幼儿的营养主要摄入是奶粉 蛋白质 糖类 脂肪 奶粉中含有大量的三聚氰胺 营养不良，身体小，脑袋大 四、三聚氰胺的检测方法 1、色谱检测法 2、离子色谱法 3、红外光谱法 4、容量分析法 5、毛细管电泳法 等等 红外光谱检测 优点： ①无需分离提取 ②样品快速无损 ③结果直观准确 ④分析精度高 红外光谱检测 傅里叶变换红外光谱仪结构图 红外光谱检测 仪器检测原理 迈克尔逊干涉仪 迈克尔逊干涉仪 红外光谱检测 原理： 在红外线照射下每种分子都有其结构和组成决定的独有的红外吸收光谱 对纯奶粉与加入少量三聚氰胺的奶粉样品绘制红外透过率光谱图，通过比较，定性判断聚氰胺特定官能团及特征峰 红外光谱检测 仪器设备： ①日本岛津 傅里叶变换红外光谱仪IRPrestige-21型 ②天津市科器高新技术公司 压片机 ③电子天平 ④玛瑙研钵 样品准备： 全脂奶粉 三聚氰胺 溴化钾 红外光谱检测 样品压片制备： ①将纯度为99％溴化钾150mg通过玛瑙研体进行研磨。研磨后压制成本底透明薄片。 ②取奶粉1mg与150mg溴化钾进行混合研磨，研磨后压制成奶粉透明薄片。 红外光谱检测 ③三聚氰胺1mg与150mg溴化钾进行混合研磨压制成三聚氰胺透明薄片。 ④取奶粉lmg、三聚氰胺0.001mg和150mg溴化钾进行混合研磨，压制透明薄片 红外光谱检测 谱图采集： 红外光谱仪预热30min以上 扫描范围4400—500cm 分辨率4cm-1 每个样品扫描32次 求平均值 以溴化钾作为本底，获取样品谱图。 纯奶粉红外透过率光谱 三聚氰胺红外光谱图 二聚氰胺主要官能团峰值 3467cm 3419cm NH2反对称伸缩振动 1651cm N-H扭曲振动 1551cm 三嗪环芳香族C=N伸缩振动 含有0.1％三聚氰胺奶粉红外谱图 3419cm-1和l 551cm-1处为三聚氰胺的NH2和三嗪环芳香族C=N伸缩振动特征吸收峰 2924cm-1 2852cm-1和1745cm-1 为奶粉甲基 氨基酸的特征吸收峰 纯奶粉a 三聚氰胺b 含有0.1%三聚氰胺的奶粉c谱图叠加 。 奶粉与三聚氰胺红外特征吸收峰 实验结论： 若样品在傅里叶红外光谱图中3467m-1 3419cm-1、1551cm-1和814cm-1处有明显特征吸收峰 则可判断该奶粉样品中含有三聚氰胺。 高效液相色谱法（HPLC) 测定原料乳和乳制品中三聚氰胺采用HPLC 以三氯乙酸乙腈为提取液，经混合型阳离子交换固相萃取柱富集净化后采用 C18 或 C8 柱，以乙腈和柠檬酸—辛烷磺酸钠缓冲液为流动相 采用二极管阵列检测器或紫外检测器检测，在添加量为 2.00～10.00 mg/kg 的浓度范围内回收率在 80%～110%，定量限为 2.00 mg/kg 液相色谱—质谱联用仪 超高效液相色谱—质谱联用法 利用超高效液相色谱电喷雾串联三重四级杆质谱技术可测定食品中的三聚氰胺， 利用三氯乙酸溶液提取蛋白中的三聚氰胺并形成蛋白络合物沉淀，乙酸铅溶液结合含有 SO42-、SO32-等离子的杂质形成沉淀，进一步提高了提取效率，三氯乙酸可作为离子对试剂进行液相色谱—质谱分析。 拉曼光谱仪 拉曼光谱法