用热休克法诱导虹鳟四倍体最佳参数的研究.PDF

第22卷第4期 大 连 水 产 学 院 学 报 Vol.22 No.4 20 0 7 年 8 月 JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY Aug. 2007 文章编号:1000-9957(2007)04-0278-06 用热休克法诱导虹鳟四倍体最佳参数的研究 1 1 2 3 孙 静 娴 ,摇 赵摇 文 ,摇 左 中原 ,摇 贾 沁 贤 (1.大连水产学院辽宁省省级高校水生生物学重点实验室,辽宁 大连 116023;2.山西省水产研究所,山西 太原030006; 3.中国地质科学研究院盐湖与热水资源研究中心,北京 100037)摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摘要:采用热休克法抑制受精卵第一次卵裂诱导虹鳟Oncorhynchus mykiss 四倍体, 对影响热休克处理效果 的3个参数: 处理温度 (26 ~31 益)、 处理持续时间 (3 ~16 min)、 处理起始时刻 (3 h 15 min ~6 h 50 min) 进行了研究。 结果表明: 在授精后3 h45 min, 于31 益下热休克处理5、 6、 7 min, 或30 益下处理 7、 10 min, 或29 益下处理10 min, 或28 益下处理16 min, 都能成功地诱导出虹鳟四倍体胚胎, 四倍体的 诱导率为13% ~33%, 发眼期相对存活率为19郾52% ~96郾54%。 关键词:虹鳟; 四倍体; 热休克 中图分类号: S961郾6摇 摇 摇 摇 文献标识码: A 摇 摇 虹鳟 Oncorhynchus mykiss 原产于北美洲的太平 1摇 材料与方法 洋沿岸, 是适应性广泛的冷水性经济鱼类。 但虹鳟 的性腺成熟和周期性繁殖, 使其生长速度严重滞 1郾1摇 材料 缓, 抗病能力大大降低, 极大地影响了其养殖效 试验用虹鳟亲本取自山西省虹鳟鱼试验场, 为 益。 因此, 改良虹鳟鱼种质、 减少由性腺发育带来 驯养成熟的2~3龄鱼。 的不利影响已成为全球虹鳟养殖业提高经济效益和 1郾2摇 方法 产品竞争力的重要任务。 人工诱导鱼类四倍体的目的, 是期望通过获得 1郾2郾1摇 受精卵的处理摇 试验当天挑选刚成熟的亲 能育的人工四倍体鱼与正常二倍体鱼交配得到大量 鱼, 用挤压法采集精、 卵, 人工干法授精。 卵子授 可供养殖生产的三倍体后代, 为大规模生产三倍体 精后, 将其立即移至 (10郾5依0郾5)益水浴中等待热 鱼提供有效途径。 诱导四倍体是通过抑制受精卵第 休克处理。 受精卵入水的时刻作为受精卵发育的起 一次卵裂, 使本应分裂的两个细胞合二为一, 从而 始时刻。 本研究共进行了4次试验, 每次试验均选 达到染色体组的加倍。 这是一个较为复杂的动态过 取1~2尾体重与年龄相近的性成熟亲鱼采集精子 程, 其技术具有一定的难度。 国外学者曾对诱导四 和卵子, 雌鱼及卵子的采用情况见表1。 [1-5] [6] 倍体虹鳟做过相关研究 , 国内仅有马涛等 用 1郾2郾2摇 热休克处理摇 将受精卵于授精后等分成所 热休克法得到5%的虹鳟四倍体胚胎, 但这些研究 需要的份数, 分别置于小网筐 (容积为0郾192 L, 中所设置的诱导条件范围较广, 确定的诱导参数存 网眼直径为1郾5 mm) 中, 卵堆积厚度为1~2 层, 在一定差异。 因此, 探索诱导四倍体的最佳