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- 2018-11-01 发布于广西
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西南大学硕士学位论文
摘要
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硕士学位论文
家蚕30K蛋白LP7的分离纯化及功能初探
特种经济动物饲养专业硕士研究生
摘 要
家蚕30K蛋白是在家蚕血液中大量表达的一类低分子量脂蛋白,也是桑蚕特有的一类蛋白质。该类蛋白由脂肪体合成,并分泌到血液中,它们是家蚕生长发育过程中的主要存储蛋白之一,也是家蚕胚胎发育的重要能源物质。30K蛋白成员众多,其氨基酸序列同源性较高,因此对这类蛋白进行分离纯化较为困难。目前,已经分离纯化出的30K蛋白只有4种。家蚕基因组框架图的完成为我们提供了大量的数据资源,利用这些数据预测到10个30K蛋白基因,这些基因所编码的氨基酸数目在246-271个之间,理论等电点在6.1-8.4之间,分子量在28-31kD之间,它们的氨基酸序列同源性都在60%以上。本研究通过分析各类30K蛋白的理论等电点和分子量,设计并开展了30K蛋白的纯化工作,获得了一种新的30K蛋白,在此基础上对该蛋白进行了相关的分析和研究,主要结果如下:
本研究首先参考了10个30K蛋白的理论分子量和等电点,设计了分离纯化的实验流程和实验条件。通过硫酸铵沉淀和三种层析分离技术(阴离子交换层析、阳离子交换层析和疏水层析),对家蚕血液蛋白质进行分离纯化,最终获得一种30K蛋白。通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix
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