第十三讲分光光度-精选（公开课件）.pptVIP

2. 等摩尔连续变化法: M:R=1:1 0.5 0.33 cM/c cM/c M:R=1:2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 六、一元弱酸离解常数的测定 HL H＋＋L Ka＝[H+][L]/[HL] 高酸度下，几乎全部以HL存在，可测得AHL＝εHL·c(HL)； 低酸度下，几乎全部以L存在，可测得AL ＝εL·c(HL). 代入整理： 或 配制一系列c相同,pH不同的溶液,测A. HL、L 颜色不同 [HL] [L] MO吸收曲线 Aa(HL) Ab (L) 1 2 3 4 5 6 Ab 6 5 4 3 2 1 Aa 350 400 450 500 550 600 ?/nm A 曲线 pH 1 1.10, 1.38 2 2.65 3 3.06 4 3.48 5 3.98 6 5.53,6.80 由每份溶液的一对pH、A，可求得一个Ka, 取平均值即可。 1 了解分子对光的吸收与溶液颜色的关系. 吸收曲线—定性分析的基础。 定量分析的基础—朗伯-比尔定律：A=?bc=-lgT 式中各参数的物理意义，定量计算。 2 了解目视比色法、分光光度法的特点，分光光度计的基本部件。 3 灵敏度的表示—摩尔吸光系数的意义和计算； 准确度—适宜的测量范围、偏离比尔定律的原因。 4 显色反应及条件的确定: 显色剂用量、酸度、时间、温度、干扰及消除。 5 应用: 单一组分测定示例、多组分测定、光度滴定、络合物组成的测定、酸碱离解常数的测定。 小结 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 二、光电比色法 光电比色计结构示意图 通过滤光片得一窄范围的光(几十nm) 滤光片 吸收滤光片：只允许指定的窄范围波长光通过，其他波长的光均被吸收。 选择滤光片的原则： 滤光片透光率最大的光是溶液吸收最大的光, 即滤光片的颜色与有色溶液的颜色互补。 三、 分光光度法和分光光度计 * 通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光， 波长可调, 故选择性好, 准确度高。 光源 单色器 样品池 检测器 读出系统 1.分光光度计的基本原件 常用光源 光源 波长范围(nm) 适用于 氢灯 185~375 紫外 氘灯 185~400 紫外 钨灯 320~2500 可见，近红外 卤钨灯 250~2000 紫外，可见，近红外 氙灯 180~1000 紫外、可见（荧光） 能斯特灯 1000~3500 红外 空心阴极灯 特有 原子光谱 激光光源 特有 各种谱学手段 氙灯 氢灯 钨灯 单色器 作用:产生单色光 常用的单色器：棱镜和光栅 样品池（比色皿） 厚度(光程): 0.5, 1, 2, 3, 5…cm 材质：玻璃比色皿－－可见光区 石英比色皿－－可见、紫外光区 检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器： 光电管 光电倍增管 光二极管阵列 光电管分为红敏和紫敏，阴极表面涂银和氧化铯为红敏，适用625－1000nm波长；阴极表面涂锑和铯为紫敏，适用200－625nm波长 1)单光束分光光度计 2.分光光度计的基本类型 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 2) 双光束分光光度计 * 双光束型可以消除光源强度变化的影响。 比值 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 光束分裂器 多通道仪器（Multichannel Instruments） 光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管) photodiode arrays (PDAs) 同时测量200～820nm范围内的整个光谱, 比单个检测器快316倍,信噪比增加3161/2 倍. * 3) 其他类型分光光度计 纤维光度计 将光度计放入样品中, 原位测量. 对环境和过程监测非常重要. 7.4 显色反应及影响因素 要求： a. 选择性好 b. 灵敏度高 (ε104) c. 产物的化学组成稳定 d. 化学性质稳定 e. 反应和产物有明显的颜色差别 (?l60nm) 没有颜色的化合物，需要通过适当的反应定量生成有色化合物再测定－－ 显色反应 一、 显色反应 二、 显色反应的影响因素（显色反应条件） a 溶液酸度（pH值及缓冲溶液） 影响显色剂的平衡浓度及颜色，改变Δl 影响待测离子的存在状态，防止沉淀 影响络合物组成