基础知识和7180应用.PDF

基础知识和7180应用 关于关于7180  基本概念基本概念  酶的生物学特性  生化仪简介  日立日介简介  参数输入介绍 基本概念基本概念  准确度准确度  灵敏度  精密度  溯源性溯源性 基本概念基本概念  准确度准确度：：测定值和真值之间的符合程度测定值和真值之间的符合程度。用回收试验来检查用回收试验来检查  精确度：指同一标本用同样的方法在相同的条件下连续多次重复 测定所得到的各次结果之间或各次结果和均值之间的符合程度。 主要用重复性试验来检查主要用重复性试验来检查。 （（SDSD或或CVCV ））  灵敏度：化学反应中的最小检出量。越小越灵敏。不一定反应的 灵敏度越小越好。要由医学决定水平来决定。  特异性特异性：专专一性性，只和待测物质起反应只和待测物质起反应，对其它物质毫无或基本对其它物质毫无或基本 无影响。  误差：测定值与真值之间的差异。分系统误差和偶然误差。 酶学常识酶学常识 血清酶学测定是临床化学检验的重要组成部分,在 肝脏功能评价肝脏功能评价、心肌损伤判断心肌损伤判断、胰腺炎鉴别诊断以及胰腺炎鉴别诊断以及 在其他方面的应用中起着重要的作用,是现代临床化学 中最频繁测定的项目之一。 酶的特性酶的特性 11. 高效催化性高效催化性 2. 没有副反应 3. 高度专一性 4.4. 催化作用受调控催化作用受调控  零级反应期零级反应期： 在酶反应的最初阶段，底物过量的 情况下，单位时间内产物或底物的 变化量或反应速度是恒定的变化量或反应速度是恒定的。 反应速度与酶活性成正比。  一级反应期： 随着反应时间的不断延长，底物不 断被消耗断被消耗，，使酶不能被饱和使酶不能被饱和，，产物产物 或底物变化曲线会逐渐平坦，即反 应速度下降。 反应速度与底物浓度成正比反应速度与底物浓度成正比。 酶活力酶活力  酶活力国际单位酶活力国际单位：一个国际单位为在实验条件个国际单位为在实验条件 下（如温度为25度、最适PH、最适地物浓度 时时）），每分钟催化每分钟催化一微摩尔底物变化所需要的微摩尔底物变化所需要的 酶量。可用IU/L或IU/ml表示。  酶活性是通过测定酶促反应过程中单位时间内 底物的减少量或产物的生成量，即测定酶促反 应的速率来获得的。 酶活力的影响因素酶活力的影响因素 11. 样品处理的影响样品处理的影响 a 溶血 bb 抗凝剂抗凝剂 c 样品的稳定性 d 样品稀释样品稀释 2 . 测定条件的影响 a 温度 b PH 3. 缓冲液 工具酶具酶 1. 作为作为试剂剂用于测测定化合物浓度或酶物浓度或酶活性的酶的酶。 2.2. 分两种方式分两种方式：： ① 借助酶来测定某一化合物的浓度 ② 借助酶来测定另一种酶的活力 常用常用工具酶具酶 1. NADHNADH+或或NADPHNADPH偶联的脱氢酶偶联的脱氢酶 ① 乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 ②② NADH或或NADPH在在340nm有特征性光吸收有特征性光吸收，，而它而它 们的氧化型NAD 或NADP 则没有这个吸收峰，+ + 340nm波长处的吸光度与波长处的吸光度与NAD （（P））H的浓度成的浓度成 正比。 常用常用工具酶具酶 （例例一） 一、MDHMDH偶联偶联NADHNADH AST L-天门冬氨酸 + a-酮戊二酸 L-谷氨酸 + 草酰乙酸 MDH 草酰乙酸 + NADH+ H+ L-苹果酸 + NAD+ MDHMDH偶联偶联NADHNADH 常用常用工具酶具酶 （例例二） NADH