辛伐他汀铵盐残留溶剂检测的方法验证的方案.docVIP

辛伐他汀铵盐残留溶剂检测的方法验证的方案 　　摘要：目的：确保此分析方法能够有效准确检出我公司生产的辛伐他汀铵盐残留溶剂，确保辛伐他汀铵盐残留溶剂检测方法准确、重现并耐用。方法：对我公司所采用的辛伐他汀铵盐残留溶剂检测方法进行验证，本次验证的项目包括系统适用性验证、专属性试验、准确度试验和精密度试验。结论：从分析的结果看，使用气象色谱法对检测辛伐他汀铵盐残留溶剂具有很高的准确性，值得推广。 　　关键词：辛伐他汀铵盐；残留溶剂；气象色谱；方法验证 　　、引言 　　辛伐他汀（simvastatin）是他汀类（statin）的降血脂药物，用于控制血液中胆固醇的含量以及预防心血管疾病。辛伐他汀是土曲霉发酵产物的合成衍生物。辛伐他汀为羟甲基戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶抑制剂，抑制内源性胆固醇的合成，为血脂调节剂。文献资料表明，有降低高脂血症家兔血清、肝脏、主动脉中总胆固醇（TC）的含量，降低极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平的作用。 　　辛伐他汀铵盐是辛伐他汀生产工艺中的中间产物，生产辛伐他汀铵盐工艺中使用有机溶剂N，N-二甲基甲酰胺（DMF），该溶剂毒性较大，因而如何对这些溶剂进行精确的测量有很重要的意义。此溶剂均不易挥发，因此本法采取手动进样的方法，因辛伐他汀铵盐本身不溶于水及其酸和碱溶液，所以采用甲醇为溶剂。 　　所谓药品中的残留溶剂就是指，在制剂、药品以及辅料等的生产过程中，存在一些有机挥发性化合物在生产过程中未能完全除去。在对辛伐他汀药物进行合成的工艺中，往往需要选择合适的溶剂以达到提高产量、纯度等目的，因此在药物生产合成过程中，有机溶剂的利用是必不可少而又非常关键的。残留溶剂必须控制在药品安全值以下，否则就会对服用者或环境造成严重的威胁，目前人们也越来越重视对药品中残留溶剂的控制。在《中华人民共和国药典》和人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）中就对DMF有明确定义和规定[2]，DMF被定义为二类溶剂，要求药品生产中必须针对DMF的残留量进行严格检测。本文中，笔者参照美国药典方法的色谱条件，采用外标法测定辛伐他汀铵盐产品中的残留溶剂，对该检测方法进行相关验证，具体过程如下： 　　2、检测方法 　　2.1 检测仪器 　　在本次实验中，笔者主要采用安捷伦气相色谱，柱子采用毛细管柱（填充物为二甲基硅氧烷以及氰丙基苯），型号为DB-624。所使用DNF溶剂和甲醇均采用分析纯，所用载气（高纯氮）线速度：30cm/s（恒压模式）；空气：400ml/min；高纯氢（纯度99.999%以上）：40 ml/min；柱温： 70℃保持0分钟，以速率为10℃/min升温至200℃保持1分钟；进样口温度：200℃；分流比：1：1；检测器温度：FID（250℃）。 　　2.2试剂的配制 　　参比溶液：精密称取N，N-二甲基甲酰胺16mg于预先装适量甲醇的100ml量瓶中，振摇溶解后，加甲醇稀释至刻度摇匀，吸取此溶液1ml于10ml量瓶中， 加甲醇稀释至刻度摇匀即得。 　　样品溶液：取本品0.2g，精密称定，置于10ml容量瓶中， 加甲醇振摇溶解，稀释至刻度摇匀即得。 　　根据我厂辛伐他汀铵盐生产工艺，我们的产品可能含有的有机溶剂为：N，N-二甲基甲酰胺（DMF），其被定义为二类溶剂，DMF残留溶液限度指标为880ppm。 　　2.3测定方法 　　2.3.1 取待测定溶液， 进行色谱分析； 　　2.3.2 样品中残留溶剂残留量按下式计算： 　　Ci（ppm）=RFi×Asi×KWsi （1） 　　式中： 　　RFi—DMF的校正因子； 　　Ci-测试液中DMF残留量（ppm） 　　ASi—测试液中DMF的主峰面积； 　　Ws—样品重量（g）； 　　K-样品稀释因子（10）。 　　3、验证方案 　　3.1 验证可接受标准 　　验证可接受标准具体如下表1所示，（以下溶剂指：DMF） 　　3.2系统适用性验证 　　按上述色谱条件，连续6次注入参比溶液，记录色谱图。按公式计算DMF峰面积的相对标准偏差，将测试数据和计算结果填入表2。 　　满足重复进样所有溶剂峰面积的相对标准偏差均应不超过15.0%的判断标准。 　　3.3 专属性试验 　　3.3.1溶液的配制 　　DMF贮备液：称取DMF标准品16mg置于预先装有适量甲醇100ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。参比液：精密吸取DMF贮备液1ml于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀；密封，即得。样品溶液：取本品0.2g，精密称定，置于10ml容量瓶中， 加甲醇振摇溶解，稀释至刻度摇匀即得。样品加参比液：称取约0.2g辛伐他汀铵盐置于10ml容量瓶中，精密吸取1ml DMF贮备液于此1