凡纳滨对虾LvRab5B蛋白与IHHNV病毒蛋白的互作.PDFVIP

第42 卷 第 11 期 水 产 学 报 Vol. 42, No. 11 2018 年 11 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Nov., 2018 文章编号: 1000-0615(2018)11-1829-11 DOI: 10.11964/jfc.20170810929 凡纳滨对虾LvRab5B蛋白与IHHNV病毒蛋白的互作 1 1 2 1 1 刘青云 ， 李强勇 ， 王韶韶 ， 朱威霖 ， 彭 敏 ， 1 1 1 1 曾地刚， 陈秀荔， 杨春玲 ， 赵永贞 ， 1 1 1 1* 彭金霞 ， 何苹萍 ， 韦嫔媛 ， 陈晓汉 (1. 广西壮族自治区水产科学研究院，广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，广西 南宁 530021 ； 2. 广西大学动物科技学院，广西 南宁 530005) 摘要：为了探究LvRab5B蛋白在凡纳滨对虾抗病毒感染中的作用，实验分别构建了Lv- Rab5B蛋白在昆虫和酵母细胞中的融合表达载体，将不同的载体导入不同的细胞中，利 用免疫荧光和酵母双杂交的方法研究了Lv Rab5B 蛋白在昆虫细胞中的表达以及 LvRab5B蛋白与病毒IHHNV之间的互作关系；通过qRT-PCR方法研究了该蛋白在健康对 虾不同组织中的表达情况以及凡纳滨对虾分别感染IHHNV和WSSV后不同时间点的相对 表达量。结果显示，LvRab5B基因融合蛋白能够在昆虫细胞中表达；LvRab5B蛋白与IH- HNV 病毒衣壳蛋白CP无相互作用，而与非结构蛋白NS1 相互作用明显，与非结构蛋白 NS2 作用较弱。qRT-PCR结果显示，LvRab 5B 基因在凡纳滨对虾心脏、鳃腺、肠道、胃、 肝胰脏和肌肉中都表达，在肠道中表达量最高，肝胰脏次之；LvRab5B蛋白在凡纳滨对 虾机体感染病毒前后的表达情况不同，感染初期表达降低，随后迅速上升，末期下降。 研究表明，LvRab 5B 基因参与凡纳滨对虾抵抗IHHNV和WSSV 病毒的先天免疫过程，为 进一步研究LvRab5B蛋白在对虾机体中的免疫功能及作用机制奠定了基础。 关键词: 凡纳滨对虾；LvRab5B蛋白；IHHNV ；酵母双杂交 中图分类号: S 941.41 文献标志码: A 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)亦称南美 必要针对各种免疫因子在对虾机体中的作用机 白对虾，是世界上对虾养殖的三大品种之一， 理进行研究，阐明对虾的免疫调节机制，为对 也是我国海水养殖的主导品种。由病毒、细菌 虾的病害防控提供科学依据。 和真菌等病原体引起的传染性疾病是影响对虾 近年来很多研究表明，Rab (Ras-like protein 养殖业健康发展的主要障碍之一，有效控制对 in rat brain)蛋白不