3.紫外可见分光光度法课件.ppt

小结 饱和有机化合物无UV-Vis； 电子跃迁类型与分子结构及存在基团有密切关系 显色剂的用量 M + nR = MRn 定量反应 实际工作中，作 A ~ cR 曲线，寻找适宜 cR 范围。 cR cR cR 酸度的选择 酸度的影响 副反应 M + nR = MRn OH- H+ 存在型体的变化 RH = R- + H+ ?1 ?2 生成不同配比的络合物 例，磺基水杨酸 – Fe 3+ pH = 2 ~ 3 FeR 紫红色 pH = 4 ~ 7 FeR2 橙色 pH = 8 ~ 10 FeR3 黄色 酸度的选择 理论计算 以 作图 可得适宜pH范围 实际工作中，作 A ~ pH 曲线，寻找适宜 pH 范围。 A pH M + nR = MRn OH- H+ 温度的选择 实际工作中，作 A ~ T 曲线，寻找适宜反应温度。 A T A T A T A T A T 反应时间的选择 实际工作中，作 A ~ t 曲线，寻找适宜反应时间。 测量条件的选择 选择适当的测量波长 原则：吸收最大，干扰最小，准确度高 选择没有吸收干扰、吸光度较大而且峰顶比较平坦的 最大吸收波长。 选择适宜空白溶液 I0 It 参比 样品 Ir I0′ I0′ Ir 参比溶液 Ia 空白溶液的选择 原则： 扣除非待测组分的吸收 以显色反应为例进行讨论 M + R = M-R ?max 试液 显色剂 溶剂 吸光物质 参比液组成 无吸收 无吸收 光学透明 溶剂 基质吸收 无吸收 吸收 不加显色剂的试液 无吸收 吸收 吸收 显色剂 基质吸收 吸收 吸收 吸收 显色剂 + 试液 + 待测组分的掩蔽剂 若欲测 M-R 的吸收 ?max A （样） = A （待测吸光物质） + A （干扰）+ A （池） A （参比） = A （干扰）+ A （池） 选择适当的溶剂 紫外-可见光谱一般是在相当稀的溶液(10-2～10-6mol/L) 中测定的。在选择溶剂时需注意： (1)溶质易溶，两者不发生化学作用； (2)具有适当的沸点，在测量过程中溶剂的挥发不至于明显影响样品的浓度； (3)具有适当的透光范围，不影响样品吸收曲线的测定。 (4)价廉易得，使用后易回收。 一、工作原理及仪器结构框图 光源 碘钨灯 氘灯 单色器 测量池 参比池 样品池 光电管 数据处理和仪器控制 光源 样品池 单色器 检测器 数据处理 仪器控制 3-4 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计组件 光源 单色器 样品池 检测器 信号输出 氢灯，氘灯，185 ~ 350 nm； 卤钨灯，250 ~ 2000 nm. 基本要求：光源强，能量分布均匀，稳定 作用：将复合光色散成单色光 棱镜 光栅 玻璃， 350 ~ 2500 nm, 石英，185 ~ 4500 nm 平面反射光栅 玻璃，光学玻璃，石英 作用：将光信号转换为电信号，并放大 光电管，光电倍增管，光电二极管，光导摄像管（多道分析器） 表头、记录仪、屏幕、数字显示 二、主要部件 1. 光源（辐射源） （1） 光源的要求： 发射强度足够且稳定的连续光谱; 光辐射强度随波长的变化小; 有足够的使用寿命． 钨灯（钨的熔点为3680K）； 波长范围：320~2500nm； 工作温度：3000K； Ihv∝ V3~4． （2） 白炽光源 常用类型：白炽光源与气体放电光源． 卤钨灯：在钨灯中加入卤化物提高白炽灯的使用寿命． （3）气体放电光源 氢弧灯（氢灯）：波长范围：165~350nm； 氢气压力：0.2~5mmHg。 氘灯：内充气为氘辐射强度比氢灯强3~5倍。 2. 单色器: 平面衍射光栅 4. 检测器：光电管 光源 碘钨灯 氘灯 单色器 测量池 CCD检测器 数据处理和仪器控制 光二极管阵列检测器（PDA） 3. 测量池：液池、样品池、比色皿。 吸收池的材料 玻璃 360 nm 2.25 mm 石英 200 nm 2.5 mm 吸收池的形状 波长范围 3. 使用注意事项 容易破碎 可拆卸圆形测量池 两面透光 圆形测量池 两面透光 1cm 长方形测量池 两面透光 气体测量池 两面透光 微量测量池 两面透光 流动测量池 两面透光 二、分光光度计的类型 优点：结构简单、 价格低廉． 缺点： 受光源、检测器的波动影响：不能自动记录吸收光谱。 问题：请扼要叙述在非扫描型（单光束）的紫外-可见分光光度计上，人工绘制吸光