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翔宇集团监利中学高一年级必修1实验总汇 编辑人：邵丽君 审编人：常祝华 一、检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 1．实验原理及步骤 2．实验注意问题 (1)还原糖鉴定的实验材料要求 ①浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。 ②还原糖含量高：不能用马铃薯(富含淀粉)、甘蔗、甜菜(富含蔗糖)。 唯一需要加热——还原糖鉴定，且必须水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。 (3)非还原糖(如蔗糖)＋斐林试剂eq \o(――→,\s\up7(水浴),\s\do5(加热))现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。 (4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定，实验用体积分数为50%酒精的作用——洗掉浮色。 (5)记准混合后加入——斐林试剂，且现配现用；分别加入——双缩脲试剂(先加A液，后加B液，且B液不能过量)。两者成分相同，但CuSO4溶液的浓度不同，所以不能混用。 (6)若用大豆做材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其粘在试管壁上不易涮洗；且该实验应预留部分组织样液做对比。 (7)易写错别字提示：“斐林试剂”中的“斐”不可错写成“非”，双缩脲试剂中“脲”不可错写成“尿”。 ——斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不同点 使用方法 甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用 使用时先加A液再加B液 呈色反应条件 需水浴加热 不需加热即可反应 反应原理 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2＋反应生成络合物 颜色 砖红色 紫色 浓度 乙液CuSO4溶液质量浓度为0.05 g/ mL B液CuSO4溶液质量浓度为0.01 g/ mL 相同点 都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH溶液质量浓度都是0.1 g/ mL 二、观察DNA和RNA在细胞中的分布 1．实验原理 (1)甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同 eq \b\lc\ \rc\}(\a\vs4\al\co1(甲基绿＋DNA\o(――→,\s\up7(呈现))绿色,罗红＋RNA\o(――→,\s\up7(呈现))红色))eq \o(――→,\s\up10(用甲基绿吡罗红混合染),\s\do4(色剂将细胞染色)) 显示DNA和RNA在细胞中的分布 盐酸：a.改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；b.使染色体中DNA与蛋白质分离，利于DNA与染色剂结合。 2．实验流程 3..实验操作应注意事项 (1)制片 ①用质量分数为0.9%的NaCl溶液而不是蒸馏水：保持口腔上皮细胞形态，细胞在蒸馏水中会吸水涨破。 ②取口腔上皮细胞时须漱口：防止混杂食物碎屑，牙签须消毒。 ③载玻片要烘干至吸附住细胞。 （2)水解 要注意掌握水温(30 ℃)和时间(5 min)，才能达到水解的目的。 (3)冲洗 ①蒸馏水：冲洗载玻片上的盐酸。 ②缓水流：防止细胞被水流冲走。 (4)染色 ①吡罗红甲基绿染色剂的配制要用蒸馏水。 ②吡罗红甲基绿染色剂是混合 染色剂，要现用现配。 ③甲基绿与DNA的亲和力强，吡罗红与RNA的亲和力强。 4．试剂及作用 (1)甲基绿吡罗红染色剂——染DNA和RNA，混合使用，现用现配。 (2)质量分数为0.9% NaCl溶液——保持口腔上皮细胞的正常形态和生理功能。 (3)质量分数为8%盐酸——改变细胞膜的通透性，使染色质DNA和蛋白质分离。 (4)蒸馏水——配制染色剂，冲洗涂片。 三、体验制备细胞膜的方法的实验 1．选取哺乳动物成熟红细胞作实验材料的原因 (1)无细胞壁，细胞易吸水涨破。 (2)无核膜和各种细胞器膜，易制得纯净的细胞膜。 (3)红细胞单个存在，便于制成悬浮液，且材料易得。 2．实验原理 利用渗透作用，使红细胞吸水涨破，除去细胞内的其他物质，制得细胞膜。 3．实验步骤 选材：猪(或牛、羊等)的新鲜的红细胞稀释液 　↓ 制作装片：用滴管吸取少量红细胞稀释液，滴一滴在载玻片上，盖上 盖玻片 　↓ 观察：用显微镜观察红细胞形态(由低倍→高倍) 　↓ 滴蒸馏水：在盖玻片的一侧滴，在另一侧用吸水纸吸引 　↓ 观察：持续观察细胞的变化 　↓ 结果：凹陷消失，细胞体积增大，细胞破裂，内容物流出，获得细胞膜 注意事项 (1)取出红细胞后应先用适量的质量分数为0.9%的NaCl溶液(生理盐水)稀释，以使红细胞分散开并暂时维持原有形态。 操作时载物台应保持水平，否则易使蒸馏水流走。 滴蒸馏水时应缓慢，边滴加边用吸水纸吸引，注意吸力不要过大，防止细胞被吸走，同时用显微镜观察红细胞的形态变化。 如果该实验过程不是在载物台上的载玻片上操作，