牦牛和双峰驼重组朊蛋白的原核细胞表达.PDFVIP

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2018-11-16 发布于天津
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牦牛和双峰驼重组朊蛋白的原核细胞表达.PDF

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牦牛和双峰驼重组朊蛋白的原核细胞表达

2006,36(01) : 1-6 Veterinary Science in hina : S 852. 659. 7: Q 786 : A : 1673-4696(2006)01-0001-06 1, 2 1 1 1 吴润 , 陈豪泰 , 刘湘涛 , 谢庆阁 ( 1. , 730046; 2. , 730070) : 应用重组DNA 技术构建了牦牛和双峰驼重组朊蛋白的4 个达载体, 即pGEX-BoPrP (23~ 242) pGEX-BoPrP( 100~ 242) pGEX- aPrP( 25~ 241) 和pGEX- aPrP( 93~ 241) , 经转化 E. coli BL21(DE3) , 成功地获得了重组菌E . coli BoPrP( 23~ 242) E. coli BoPrP( 100~ 242) E. coli aPrP(25~ 241) 和E . coli aPrP(93~ 241) , 分别可达大小约为50.241.749.9 和42.4 ku 的融合蛋白各重组菌经1.0 mmol/ L 的IPTG 于37 e 诱导5~ 6 h 可产生占细菌总蛋白量 30% ~ 45% 的融合蛋白免疫印迹分析明, 除融合蛋白GST-BoPrP( 100~ 242) 外, GST-BoPrP (23~ 242) GST- aPrP(25~ 241) 和GST- aPrP( 93~ 241) 均可与抗牛单克隆抗体 4 11反应, 显示中国黄牛PrP 与牦牛和双峰驼PrP 具有共同的抗原成分 : 朊粒; 牦牛; 双峰驼; 原核细胞达 Prokaryotic expression of recombinant prion proteins of domestic yak and Camelus bactrianus 1, 2 1 1 1 WU Run , HEN Hao-tai , LIU Xiang-tao , XIE Qing-ge ( 1. K ey L aboratory of A nimal Virolog y, M inistry of Ag riculture/ L anz hou Veterinary Research I nstitute, Chinese A ca emy of Ag ricultural Sciences, L anz hou 730046, China; 2. College of Veterinary Me icine , Gans u Ag ricultural Univ ers ity , Lanz hou 730070, China) Abstract: By using the recombinant DNA technology, four expression plasmids, pGEX-BoPrP(23- 242) , pGEX-BoPrP( 100- 242) , pGEX- aPrP( 25- 241) and pGEX- aPrP(93- 241) , of yak and camel recombinant prion proteins were constructed, After transforming E. coli BL21( DE3) , the recombinant bacteria E. coli BoPrP(23- 242) , E. coli BoPrP ( 100- 242) , E. coli a