分子生物学基础知识优秀教案.pptVIP

一、核酸分子的基本组成 1、核苷酸 ＝ 核苷+磷酸 磷酸酯键 戊糖+碱基+磷酸 1、定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 DNA一级结构的基本特点 4种dNTP以3’、5’磷酸二酯键相连构成一个没有分枝的线性大分子。它们的两个末端分别称5’末端（游离磷酸基）和3’末端（游离羟基）。 (六) DNA与RNA在组成上的区别 二、DNA的空间结构 ②右手螺旋 2、双螺旋结构的多样性 三、DNA的功能 四、RNA的结构 (二) RNA的种类: 七、氨基酸 蛋白质是生物功能的主要载体，而氨基酸是蛋白质的构件分子。自然界存在的成千上万种蛋白质，在结构和功能上的惊人的多样性主要由氨基酸的内在性质造成的。 (一) 氨基酸的分类: 生物体中发现的氨基酸180多种，大多数是不参加蛋白质组成，这些称为非蛋白质氨基酸。 蛋白质组成的常见氨基酸或称基本氨基酸只有20种，称为蛋白质氨基酸。 存在某些蛋白质的不常见氨基酸都是肽链上由常见氨基酸修饰转化而来。 常见的蛋白质氨基酸 按R基的化学结构分类 1.脂肪族aa （1）中性aa 甘氨酸 丙氨酸 缬氨酸 亮氨酸 异亮氨酸 含羟基或硫aa 丝氨酸 半胱氨酸 苏氨酸 甲硫氨酸 胱氨酸由两个半胱氨酸通过侧链上的-SH基氧化成共价的二硫键连接而成 （３）酸性aa及其酰胺 天冬氨酸 谷氨酸 天冬酰胺 谷氨酰胺 （４）碱性aa 赖氨酸 精氨酸 ２、芳香族aa 苯丙氨酸 络氨酸 色氨酸 ３、杂环aa 组氨酸 脯氨酸 (三) 氨基酸的酸碱性质: (四) AA的光学活性和光谱性质 1.AA的光学活性和立体化学 a-氨基酸的a-碳是一个不对称原子（除了甘氨酸），因此具有旋光性。也分为两种构型D型和L型 苏氨酸，异亮氨酸，羟脯氨酸和羟赖氨酸除了a-碳原子外，还有第二个不对称碳原子。因此有四种光学异构体。它们分别称为L-，D-，L-别-，D-别-氨基酸。 L-苏氨酸 D-苏氨酸 L-别-苏氨酸 D-别-苏氨酸  氨基酸的旋光性氨基酸的旋光符号和大小取决于它的R基性质，并且与测定的溶液pH有关，这是因为在不同的pH条件下氨基和羧基的解离状况不同。 pH对L-亮氨酸（蓝）和L-组氨酸（红）的[a]D25值的影响 比旋是a-氨基酸的物理常数之一，是鉴别氨基酸的一种根据 2.氨基酸的光谱性质 紫外吸收光谱 可见光区：无吸收 远紫外和红外区：都吸收 近紫外区（200—400nm）：芳香族氨基酸 Tyr/Trp/Phe 才有吸收 原因：含有苯环共轭p键系统-C=C-C=C-C=C-C=C- 蛋白质最大吸收 在280nm 蛋白质含量测定 Trp 280nm Tyr 275nm Phe 257nm 分光光度法定量原理 e:摩尔吸收系数，c:浓度；l:吸收杯的内径或光程厚度；I0：入射光强度；I：透射光强度 核磁共振波谱 核磁共振应用 最初,核磁共振技术主要用于核物理研究方面,用它测量各种原子核的磁矩,误差仅是0. 003 %～0. 005 %; 迄今,它已广泛应用于化学、食品、医学、生物学、遗传学等学科领域,已成为在这些领域开展研究工作的有力工具,甚至是某些领域(如:化学、医学诊断、药物学等) 常规分析中不可缺少的手段。1985 年,维特里希等人公布了第一次利用NMR 法测定的溶液中蛋白质———蛋白酶抑制剂IIA ( proteinase inhibitor IIA) 的结构(如图 所示) 。1990 年用NMR 测定的蛋白质结构有23 个,而到1994 年一年测定的蛋白质结构数上升到100个。 基因经过转录、翻译，产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。 基因表达(gene expression) translation DNA mRNA protein transcription DNA RNA transcription DNA无组织特异性 基因表达有组织特异性 核酸生物合成的一般规律 1 按照碱基互补配对原则，以DNA为模板，逆转录以RNA为模板 2 5’