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激光共聚焦显微镜样品制备方法———细胞培养样品
29 2 电 子 显 微 学 报 Vol-29 ，No. 2
第 卷第 期
20 10 4 20 10 -04
年 月 Journal of Chinese Electron Microscopy Society
文章编号:1000 -628 1 (20 10 )02 -0 185 -04
( )
激光共聚焦显微镜样品制备方法 一
——— 细胞培养样品
余礼厚
( ， 20003 1)
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 上海
: ，
摘 要 随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用 绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精
。 。
确时空信息 因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法 本文主要介绍在培养细胞中表达绿
色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的制备过程。
: ; ; ;
关键词 绿色荧光蛋白 细胞培养 免疫荧光 激光共聚焦显微镜
中图分类号:Q336 文献标识码:A
［2 ］
， 考 《 ( )》 。
随着生物学研究的不断深入 越来越多的研究 分子克隆实验指南 第三版 在设计荧光
(in vivo )， ， ，
要求在细胞体内 甚至是动物体水平上研 融合蛋白前 研究者应考虑荧光融合蛋白的用途 使
。 ， (N 、C
究蛋白质功能或动态变化 而随着检测设备的提 用何种荧光蛋白 及荧光蛋白插入的位置 端
、 ， )。
升 各种显微技术的发展和标记手段的提高 使得研 端或定位信号序列之后
、
究者能够迅速 准确地观察到蛋白质在细胞内的表
2 荧光表达载体的导入
。
达情况和定位 通过激光共聚焦显微镜观察荧光标
记细胞内的蛋白质和分子，为生物学的研究提供了 ，
将构建好的荧光表达载体进行大量扩增 并通
更直观的观测手段。因此免疫荧光样品的制备也成 ，
过质粒抽提试剂盒大量纯化 得到不含有内毒素的
。 。
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