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参考教案：酵母蔗糖酶的提取纯化与鉴定 蔗糖酶（E. C. 3. 2. 1. 26）（卩一D—呋喃果糖苷果糖水解酶），能催化非还原性双糖（蔗 糖）的1, 2-糖苻键裂解，释放出等量的果糖和葡萄糖。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖 和果糖，也能催化棉子糖水解，生成密二糖和果糖。 由于果糖甜度高，约为蔗糖1.36?1.60倍，在工业上具有较高的经济价值。可用以转 化蔗糖，增加甜味，制造人造蜂蜜，防止高浓度糖浆屮的蔗糖析出，制造含果糖和巧克力的 软心糖，还可为果葡糖浆的工业化生产提供新的方法。 蔗糖酶以阿种形式存在于酵母细胞膜的外侧和内侧，在细胞膜外细胞壁中的称之为外 蔗糖酶，其活力占蔗糖酶活力的大部分，是含有50%糖成分的糖蛋白。在细胞脫内侧细胞 质中的称之为内蔗糖酶，含宥少量的糖。两种酶的蛋白质部分均为双亚基，二聚体，两种 形式的酶的氨基酸组成不同，外酶每个亚基比PJ酶多两个氨基酸，Ser和Met,它们的分 子量也不同，外酶约为27万（或22万，与酵母的来源有关），内酶约为13.5万。尽管这 W种酶在组成上有较大的差别，但其底物专一性和动力学性质仍十分和似，因此，本实验 未区分内酶与外酶，而且由于内酶含量很少，极难提取，本实验提取纯化的主要是外酶。 每摩尔蔗糖水解产生两摩尔还原糖，蔗糖的裂解速率可以通过NeLson法测定还原糖的 产生数量來测定。一个酶活力单位规定为在标准分析条件下每分钟催