1.1基因工程的基本工具课件.pptVIP

基因决定性状 青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 定向基因改造设想 : 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的概念 1、概念： 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品.又叫做DNA的重组技术 . 2、含义 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结　　果 生物体外 基因 ＤＮＡ分子水平 剪切 拼接 导入 检测与表达 人类需要的新的生物类型和生物产品 3、实 质 基因重组 例基因工程培育抗虫棉的简要过程 苏云金芽孢杆菌 (有抗虫特性) 普通棉花(无抗虫特性) 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 提取 二、基因操作的工具 1、基因的剪刀——限制性内切酶 2、基因的针线——DNA连接酶 3、基因的运输工具——运载体 1、? 分子手术刀——限制性内切酶 分布：主要在原核生物中 作用：识别双链DNA分子某种特定核苷酸序，并且将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 特点：识别序列和酶切位点的专一性 结果：产生黏性未端或平末端 举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开 G A A T T C G C T T A A A A T T C G 限制酶切割ＤＮＡ分子示意图： C T T A A G 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 切割DNA分子时产生的两种不同末端 黏性末端 平末端 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 （断开的不是氢键） 2、分子缝合针——DNA连接酶 连接的部位： 作用: 种 类： 磷酸二酯键（ “梯子”的扶手处）， 不是氢键（ “梯子”的踏板处） E.coliDNA连接酶（来自大肠杆菌只能连接黏性末端） T4DNA连接酶（来自噬菌体可连接粘性末端和平末端） 将双链DNA片断缝合起来，恢复被限制酶 切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 基因的针线——DNA连接酶 DNA连接酶连接形成 磷酸二酯键 用相同的限制性内切酶切割 目的基因 思考： （１）用DNA连接酶连接两个相同的黏性末端要连接几个磷酸二酯键？ （２）用限制酶切下一个特定基因要切断几个磷酸二酯键？ ２个 ４个 ３、分子运输车——运载体 作 用： 具备的条件： 种 类： 将外源基因送入受体细胞。 能在宿主细胞内复制并稳定地保存 具有多个限制酶切点 具有某些标记基因 质粒、噬菌体和动植物病毒 最常用运载体：质粒 大肠杆菌的质粒： 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内完成。 质粒的特点： 1、质粒是基因工程中最常用的运载体； 2、存在于许多细菌及酵母菌等生物中； 3、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并且具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子 4、最常用的质粒是大肠杆菌的质粒； 5、质粒的存在对宿主细胞无影响； 6、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 巩固练习 2）下列不是基因载体具备的条件的是 A、能自我 复制 （ ） B、有多个限制酶切点