免疫细胞分离及免疫细胞功能检测及应用.ppt

第十三章 免疫细胞分离与免疫细胞功能检测及应用;第十三章 免疫细胞的分离与免疫细胞功能检测及应用;; 三、NK细胞活性测定 第五节 其他免疫细胞功能检测技术 一、中性粒细胞功能检测 二、巨噬细胞功能检测 第六节 免疫细胞表面标志和功能检测的临床应用 ;;第一节 免疫细胞的分离 ; 一、外周血单个核细胞分离 ;细胞分离基本原理;不同细胞密度不同;不同细胞密度不同;用1.077±0.001的分层液可将细胞分离 　;分离液的基本要求;密度梯度离心法（density gradient centrifudation);密度梯度离心(Ficoll)离心　;密度梯度分离单个核细胞（Ficoll分层液）;密度梯度分离单个核细胞（Ficoll分层液）;二 、淋巴细胞分离;贴壁黏附法 将已制备的单个核细胞悬液倾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中，移至37℃温箱静置1h左右，单核细胞和粒细胞均贴于平皿壁上，而未贴壁的非粘附细胞几乎为纯淋巴细胞，继用橡皮刮下贴壁的细胞即为纯单核细胞群。因B细胞也有贴壁现象，用本法分离的淋巴细胞群中B细胞有所损失。 ;2.吸附柱过滤法 将单个核细胞悬液注入装有玻璃纤维或葡聚糖凝胶SephadexG10的柱层中，凡有粘附能力的细胞绝大部分被吸附而粘滞在柱层中，从柱上洗脱下来的细胞主要是淋巴细胞。此法简单易行，对细胞极少损害。 ;