番茄脂肪氧化酶基因TomloxD的毕赤酵母表达及遗传转化研究-分子生物学专业论文.docx

重庆大学硕士学位论文缩略词表 重庆大学硕士学位论文 缩略词表 缩略词表 ABA Abscisic acid 脱落酸 Amp Ampicillin 氨苄青霉素 Carb carbenicillin 缩苄青霉素 CaMV 35S Cauliflower mosaic virus 35S promoter 花椰菜花叶病毒 35S 启动子 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 EB Ethidium bromide 溴化乙锭 E.coli Escherichia coli 大肠杆菌 EDTA Ethylene diamine tetracetic acid 乙二氨四乙酸 Indole Acetic Acid 吲哚乙酸 IPTG Isopropyl-β-D-thiogalactoside 异丙基-β-D-硫代 半乳糖苷 JA jasmonic acid 茉莉酸 Kan Kanamycin 卡那霉素 KDa Kilodalton 千道尔顿 LA Linoleic acid 亚油酸 LB Luria-bertani media LB 培养基 LOXs Lipoxygenases 脂肪氧化酶 NPTⅡ Neomycin Phospho Transferase Ⅱ 新霉素磷酸转移酶Ⅱ OD Optical dencity 光学密度 PAGE Polyacrylamlide gel electrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PUFA polyunsaturated fatty acid 多元不饱和脂肪酸 Rif Rifampicin 利福平 RNAi RNA interference RNA 干扰 X-gal 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactoside 5-溴-4 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖 Zeatin 玉米素 VIII 重庆大学硕士学位论文1 重庆大学硕士学位论文 1 绪 论 PAGE PAGE 10 1 绪 论 1.1 植物脂肪氧化酶研究进展 自 1932 年在大豆中首次发现脂肪氧化酶（lipoxygenases，LOXs；EC 2） 以来[1]，人们对其生理功能的研究有了很大的进展。脂肪氧化酶广泛的存在于动物、植 物和微生物中[2]，在一些组织中脂肪氧化酶的表达量很高，它们的活性可能会引起一些 信号分子的合成或者诱导细胞或代谢途径的改变。哺乳动物脂肪氧化酶被认为与炎症反 应的致病机制有关，如关节炎、银屑病和支气管炎[3] ，还与脂肪沉滞性动脉硬化症、人 类免疫缺陷病毒、脑衰老、肾疾病和角蛋白最终分化有关。在植物中，脂肪氧化酶参与 种子萌发、创愈激素与茉莉酸合成和非生物胁迫反应[4]。 1.1.1 脂肪氧化酶的细胞定位 脂肪氧化酶是一类多基因家族蛋白，在拟南芥己经发现有6个脂肪氧化酶基因，马 铃薯有14个脂肪氧化酶基因，番茄有5个脂肪氧化酶基因[5]，大豆有9个脂肪氧化酶基因 [6]。脂肪氧化酶在细胞内的定位为研究其生理功能提供了有利的依据[7]，通过分析植物 子叶、叶片和果实中的脂肪氧化酶的定位表明，在微粒、胞质和液泡中都有脂肪氧化酶 存在。在黄瓜的子叶当中，除了可溶性的脂肪氧化酶外，在微粒体膜、原生质膜和脂质 体也发现了脂肪氧化酶，在黄化的的黄瓜子叶中，发现有5种不同的脂肪氧化酶[8]，而在 大豆叶片的细胞溶质和液泡中至少有6种不同的脂肪氧化酶[9]。在其它的植物的叶片中， 如菠菜、大麦、番茄、马铃薯、拟南芥，其叶绿体包膜内，有特异的脂肪氧化酶存在[10-13]。 研究表明，多数脂肪氧化酶是存在于叶绿体的基质中，但在菠菜叶片的叶绿体包膜片断 中，发现有脂肪氧化酶存在。黄瓜的脂质体和质体脂肪氧化酶的时空表达分析表明，脂 肪氧化酶的生理功能与储藏脂肪代谢和茉莉酸（jasmonic acid，JA）的形成有关[14]。 1.1.2 脂肪氧化酶的分类 通过系统树分析发现，动物和植物的脂肪氧化酶属于不同的分支，它们分别形成不 同的亚族 [15] 。脂肪氧化酶催化具有顺，顺 -1, 4- 戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸 (Polyunsaturated fatty acid, PUFA)的双加氧反应，如亚油酸(Linoleic acid, LA)、亚麻酸 (α-linolenic acid, LeA)、花生四烯(Arachidonic acid, AA)。根据加氧的位置不同，可将植 物脂肪氧化酶分为2 类：①催化亚油酸LA碳链9位加氧，氧化产物为9-过氧化氢衍生物， 这类脂肪氧化酶称为9-LOX，；②催化亚油酸LA碳链13位加氧，氧化产物为13-过氧化氢 衍生物，这类脂肪氧化酶