MicronucleusAssay-首都医科大学公共卫生学院.PPTVIP

毒理学基础 首都医科大学 卫生毒理与卫生化学系2013.10.22 实习二 小鼠骨髓细胞微核试验 （一）目的 学习和掌握小鼠骨髓多染红细胞（PCE）微核测定方法。 （二）原理 微核（micronucleus） 大小相当于细胞直径1/20 ~ 1/5，呈圆形或杏仁状，其染色与细胞核一致，在间期细胞中可以出现一个或多个。 （二）原理 微核实验可检测化学毒物或物理因素诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变两种遗传学终点。 凡能使染色体发生断裂或使染色体和纺锤体联结损伤的化学物，都可用微核试验来检测。 （二）原理 有核细胞的胞质少，微核与正常核叶及核的突起难以鉴别。 嗜多染红细胞的主核已排出，胞质内含有核糖体，姬姆萨染色呈灰蓝色；成熟红细胞（NCE）的核糖体已消失，被染成淡桔红色。骨髓中嗜多染红细胞数量充足，微核容易辨认，而且微核自发率低，因此，骨髓中嗜多染红细胞成为微核试验的首选细胞群。 （三）器材与试剂 器材： 手术刀、手术剪、无齿镊、小型弯止血钳、干净纱布、带橡皮头吸管、晾片架、玻璃蜡笔、玻璃染色缸、载玻片及推片、定时钟、带油镜头显微镜、细胞计数器 试剂：甲醇（分析纯）、甘油（分析纯）、小牛血清、生理盐水、Giemsa贮备液、磷酸盐缓冲液（pH6.8） 阳性对照物：环磷酰胺或丝裂霉素C 1.实验动物与处理 动物选择：常用大、小鼠 染毒途径：经口、经皮、经呼吸道、注射 染毒